Sulforaphane යනු කුමක්ද?

සුල්ෆර්හැන් ෆයිටෝ රසායනික ද්‍රව්‍යයකි, බ්‍රොකොලි, ගෝවා, වට්ටක්කා සහ බ්‍රසල්ස් පැළ වැනි කුරුස එළවළු වල ඇති කාබනික සල්ෆර් සංයෝගවල අයිසොතියෝසයනේට් කාණ්ඩයේ ද්‍රව්‍යයකි. එය බොක් චෝයි, ගෝවා, කරපටි, අබ කොළ සහ දියවැල් වල ද සොයාගත හැකිය. පර්යේෂණ අධ්‍යයනයන් පෙන්වා දී ඇත්තේ සල්ෆෝරාපේන් මගින් විවිධ වර්ගයේ පිළිකා වළක්වා ගත හැකි බවයි Nrf2 නිෂ්පාදනය සක්රිය කිරීම, හෝ න්‍යෂ්ටික සාධකය එරිත්‍රොයිඩ් 2 ආශ්‍රිත සාධකය, ඔක්සිකාරක වලට සෛල ප්‍රතිචාරය පාලනය කරන ආරක්ෂිත ප්‍රතිඔක්සිකාරක යාන්ත්‍රණ නියාමනය කරන පිටපත් කිරීමේ සාධකයකි. පහත ලිපියේ අරමුණ සල්ෆෝරාපේන් වල ක්‍රියාකාරිත්වය විස්තර කිරීමයි.

වියුක්ත

KEAP1-Nrf2-ARE ප්‍රතිඔක්සිකාරක පද්ධතිය සෛල ඔක්සිකාරක සහ xenobiotic ආතතීන්ට ප්‍රතිචාර දක්වන ප්‍රධාන මාධ්‍යයකි. Sulforaphane (SFN), cruciferous එළවළු වලින් ලබාගත් ඉලෙක්ට්‍රොෆිලික් isothiocyanate, KEAP1-Nrf2-ARE මාර්ගය සක්‍රීය කරන අතර නිදන්ගත ඔක්සිකාරක ආතතිය ප්‍රධාන හේතු විද්‍යාත්මක කාර්යභාරයක් ඉටු කරන රෝග සඳහා ප්‍රතිකාර කිරීමේදී උනන්දුවක් දක්වන අණුවක් බවට පත්ව ඇත. SFN සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද සංස්කෘතික, මානව දෘෂ්ටි විතානයේ වර්ණක එපිටිලියල් (RPE-1) සෛලවල මයිටොකොන්ඩ්‍රියා Nrf2 සහ එහි සයිටොප්ලාස්මික් නිෂේධක KEAP1 යන දෙකෙන්ම ස්වායත්ත වන හයිපර්ෆියුෂන් වලට භාජනය වන බව අපි මෙහිදී පෙන්නුම් කරමු. මයිටොකොන්ඩ්‍රියා විලයනය ඇපොප්ටෝසිස් අතරතුර මයිටොකොන්ඩ්‍රියා හි සිදුරු සෑදීම වළක්වමින් සයිටොප්‍රොටෙක්ටිව් බව වාර්තා වී ඇති අතර, මෙයට අනුකූලව, අපි ඇපොප්ටෝසිස් ප්‍රේරකයට නිරාවරණය වන එස්එෆ්එන්-ප්‍රතිකාර කළ සෛලවල Nrf2-ස්වාධීන, සයිටොප්‍රොටෙක්ෂන් පෙන්වමු. යාන්ත්‍රිකව, SFN ද්‍රාව්‍ය විඛණ්ඩන සාධකය Drp1 මයිටොකොන්ඩ්‍රියාවට සහ පෙරොක්සිසෝමවලට බඳවා ගැනීම සහ/හෝ රඳවා ගැනීම අවම කරන නමුත් සමස්ත Drp1 බහුලත්වයට බලපාන්නේ නැත. මෙම දත්ත පෙන්නුම් කරන්නේ SFN හි වාසිදායක ගුණාංග KEAP1-Nrf2-ARE පද්ධතිය සක්‍රිය කිරීමෙන් ඔබ්බට විහිදෙන අතර බහු සායනික අත්හදා බැලීම් වලදී මෙම නියෝජිතයාගේ වර්තමාන භාවිතය අනුව වැඩිදුර ප්‍රශ්න කිරීම අවශ්‍ය බවයි.

ප්රධාන වචන: Sulforaphane, Nrf2, Drp1, Mitochondria, විඛණ්ඩනය, Fusion, Apoptosis

හැදින්වීම

Sulforaphane යනු මයිටොකොන්ඩ්‍රිය විඛණ්ඩනයේ Nrf2-ස්වාධීන නිෂේධකයකි.

Sulforaphane (SFN) යනු කුරුස සහිත එළවලු වලින් බහුලවම ආහාර වේලෙහි ව්‍යුත්පන්න වූ isothiocyanate සංයෝගයකි [56]. හානියට පත් සෛල වලින් හයිඩ්‍රොලිටික් එන්සයිම මයිරොසිනේස් වෙසිකියුලර් මුදා හැරීම හරහා විලෝපිකයට xenobiotic ප්‍රතිචාරයක් ලෙස එය ශාක තුළ ජනනය වේ. මෙම එන්සයිමය glucosinolates isothiocyantes බවට පරිවර්තනය කරයි [42]. පසුගිය දශක දෙක තුළ, SFN එහි වාර්තා වූ පිළිකා නාශක, ප්‍රතිඔක්සිකාරක සහ ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී ගුණාංග සඳහා පුළුල් ලෙස සංලක්ෂිත වී ඇත [57]. මෙම කාර්යක්ෂමතාවයෙන් බොහෝමයක් KEAP1-Nrf2-ප්‍රතිඔක්සිකාරක ප්‍රතිචාර මූලද්‍රව්‍ය (ARE) සංඥා මාර්ගය මොඩියුලේට් කිරීමට SFN හි ඇති හැකියාවට හේතු වී ඇත, නමුත් සංයෝගයේ අතිරේක ක්‍රියාකාරකම් හඳුනාගෙන ඇතත්, histone deacetylase ක්‍රියාකාරිත්වය නිෂේධනය කිරීම සහ සෛල චක්‍ර ප්‍රගතිය [ 29]. Nrf2 යනු ප්‍රධාන ප්‍රතිඔක්සිකාරක පිටපත් කිරීමේ සාධකය වන අතර හෝමියස්ටැසිස් තත්වයන් යටතේ, එහි ස්ථායීතාවය සයිටොප්ලාස්මික් Cullin3KEAP1 ubiquitin ligase සංකීර්ණයේ ක්‍රියාව හරහා යටපත් වේ [20]. නිශ්චිතවම, Nrf2 ඩයිමරික් උපස්ථර ඇඩැප්ටරය KEAP3 වෙත බැඳීම මගින් Cullin1KEAP1 ligase වෙත බඳවා ගනු ලබන අතර පසුව proteasome-මධ්‍යගත පිරිහීම සඳහා පිටපත් කිරීමේ සාධකය ඉලක්ක කරන polyUb දාමයන් සමඟින් වෙනස් කරනු ලැබේ. මෙම සංස්ථාපිත පිරිවැටුම ආතතියෙන් තොර සෛලවල Nrf2 හි අර්ධ ආයු කාලය විනාඩි ~15 [30], [33], [46], [55] දක්වා සීමා කරයි. බොහෝ ආකාරයේ ආතතියට ප්‍රතිචාර වශයෙන්, විශේෂයෙන් ඔක්සිකාරක ආතතිය, KEAP1, cysteine ​​පොහොසත් ප්‍රෝටීනයක්, රෙඩොක්ස් සංවේදකයක් ලෙස ක්‍රියා කරයි, සහ KEAP151 හි C1 විවේචනාත්මක සිස්ටීන්වල ඔක්සිකාරක වෙනස් කිරීම, CUL2 වෙතින් Nrf1-KEAP3 විඝටනය කරයි. 2], [8], [20]. සැලකිය යුතු ලෙස, SFN, සහ සමහර විට අනෙකුත් Nrf55 සක්‍රියකාරක, KEAP2 හි C151 වෙනස් කිරීම මගින් ඔක්සිකාරක ආතතිය අනුකරණය කරයි උදා [1]. Nrf21 ස්ථායීකරනය මගින් එහි න්‍යෂ්ටිය වෙත මාරු වීමට ඉඩ සලසයි, එහිදී එය II අදියර ප්‍රතිඔක්සිකාරක සහ ඩෙටොක්සිකරණ ජානවල බැටරියක ප්‍රකාශනය ප්‍රේරණය කරයි. Nrf2 කුඩා Maf ප්‍රෝටීන සමඟ විෂමකරණය කිරීම හරහා එහි සංජානනීය ඉලක්ක ජානවල ප්‍රතිඔක්සිකාරක ප්‍රතිචාර ප්‍රවර්ධක මූලද්‍රව්‍ය (ARE) සමඟ බන්ධනය කරයි [2]. මෙම පද්ධතිය SFN වැනි වක්‍ර ප්‍රතිඔක්සිකාරක, මයිටොකොන්ඩ්‍රියා [19] මගින් ජනනය කරන නිදහස් රැඩිකලුන් හෝ ඔක්සිකාරක ආතතියේ වෙනත් භෞතික විද්‍යාත්මක මූලාශ්‍ර [16] සඳහා ගතික සහ සංවේදී ප්‍රතිචාරයක් ඉදිරිපත් කරයි.

මයිටොකොන්ඩ්‍රියා යනු ගතික, උප සෛලීය ඉන්ද්‍රිය වන අතර එය ATP නිෂ්පාදනය සහ අන්තර් සෛලීය කැල්සියම් බෆරින් සිට රෙඩොක්ස් නියාමනය සහ ඇපොප්ටෝසිස් [13], [49] දක්වා සෛලීය ක්‍රියාකාරකම් රාශියක් නියාමනය කරයි. මයිටොකොන්ඩ්‍රියා සෛලය තුළ ප්‍රතික්‍රියාශීලී ඔක්සිජන් විශේෂවල (ROS) ප්‍රධාන මූලාශ්‍රය ද නියෝජනය කරයි. එබැවින් සෛලීය අවශ්‍යතා සපුරාලීම සඳහා ATP නිෂ්පාදනය ප්‍රශස්ත කිරීම සඳහා මයිටොකොන්ඩ්‍රිය ක්‍රියාකාරිත්වය නිසි ලෙස නියාමනය කිරීම අවශ්‍ය වන අතරම අධික නිදහස් රැඩිකල් නිෂ්පාදනයේ හානිකර බලපෑම් සමගාමීව අවම කරයි. මයිටොකොන්ඩ්‍රිය ශ්‍රිතයේ සියුම් මොඩියුලේෂන් සඳහා තීරනාත්මක අවශ්‍යතාවයක් වන්නේ මයිටොකොන්ඩ්‍රියාවට ස්වාධීනව ජෛව රසායනික යන්ත්‍ර ලෙස සහ විශාල, ප්‍රතිචාරාත්මක ජාලයක කොටසක් ලෙස ක්‍රියා කිරීමට ඇති හැකියාවයි.

මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් ජාල රූප විද්‍යාව සහ ක්‍රියාකාරිත්වය තීරණය වන්නේ විඛණ්ඩනය සහ විලයනය අතර නියාමනය කරන ලද සමතුලිතතාවයකිනි. මයිටොකොන්ඩ්‍රියා විඛණ්ඩනය සෛල බෙදීමේදී [28] මයිටොකොන්ඩ්‍රියාවේ දියණියගේ සෛල උරුමය සඳහා මෙන්ම මයිටොෆගි [1] ලෙස හඳුන්වන විධ්‍රැවීකරණය වූ හෝ හානි වූ මයිටොකොන්ඩ්‍රියාවේ වරණීය, ස්වයංක්‍රීය පරිහානිය සඳහා අවශ්‍ය වේ. ප්‍රතිවිරුද්ධව, මයිටොකොන්ඩ්‍රිය ජෙනෝම සම්පූර්ණ කිරීම සහ අසල්වැසි මයිටොකොන්ඩ්‍රියා අතර ඉලෙක්ට්‍රෝන ප්‍රවාහන දාම සංරචක බෙදා ගැනීම සඳහා විලයනය අවශ්‍ය වේ [54]. අණුක මට්ටමින්, මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් විඛණ්ඩනය සහ විලයනය විශාල, ඩයිනමින් වැනි GTPases මගින් නියාමනය කරනු ලැබේ. එන්සයිම තුනක් මූලික වශයෙන් විලයනය නියාමනය කරයි: මයිටොෆුසින් 1 සහ 2 (Mfn1/2) යනු ද්වි-පාස් පිටත පටල ප්‍රෝටීන වන අතර එය යාබද මයිටොකොන්ඩ්‍රියා [15], [25], [37] අතර විෂම අන්තර්ක්‍රියා හරහා බාහිර පටල විලයනය මැදිහත් වන අතර OPA1 අභ්‍යන්තරයකි. අභ්‍යන්තර පටලවල විලයනය නියාමනය කිරීම මගින් න්‍යාස සම්බන්ධතාව සමගාමීව සහතික කරන පටල ප්‍රෝටීන් [5]. ප්‍රෝටීන තුනේම GTPase ක්‍රියාකාරිත්වය ශක්තිමත් විලයනය සඳහා අවශ්‍ය වේ [5], [18], සහ OMA1 [1], PARL [14] සහ YME6L [1] ප්‍රෝටීස් මගින් මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් අභ්‍යන්තර පටලය තුළ ඇති සංකීර්ණ ප්‍රෝටියෝලිසිස් මගින් OPA45 තවදුරටත් නියාමනය කරනු ලැබේ. ]. වැදගත් ලෙස, හානියට පත් සහ සෞඛ්‍ය සම්පන්න මයිටොකොන්ඩ්‍රියා [26] ඒකාබද්ධ කිරීම මැඩපැවැත්වීම සඳහා කාර්යක්ෂම විලයනය සඳහා නොවෙනස්ව මයිටොකොන්ඩ්‍රිය පටල විභවය අවශ්‍ය වේ.

මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් විඛණ්ඩනය මූලික වශයෙන් උත්ප්‍රේරණය කරනු ලබන්නේ ඩයිනමින් ආශ්‍රිත ප්‍රෝටීන් 1 (Drp1/DNM1L) නම් සයිටොසොලික් ප්‍රෝටීනයක් මගිනි. Drp1 සයිටොසෝල් සිට මයිටොකොන්ඩ්‍රිය පිටත පටලය මත විඛණ්ඩනය වීමට අපේක්ෂිත ස්ථාන වෙත බඳවා ගනු ලැබේ [43]. බාහිර පටලය මත Drp1 සඳහා වන ප්‍රධාන ප්‍රතිග්‍රාහක වන්නේ මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් විඛණ්ඩන සාධකය (Mff) [32] සහ, තරමක් දුරට, Fission 1 (Fis1) [51] වේ. මීට අමතරව, MIEF1/MiD51, විඛණ්ඩන ප්‍රතිග්‍රාහකයක් සොයා ගන්නා ලද අතර එය විභව විඛණ්ඩන ස්ථානවල Drp1 ප්‍රෝටීනයේ ක්‍රියාකාරිත්වය තවදුරටත් සීමා කිරීමට ක්‍රියා කරයි [58]. මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් පිටත පටලයෙහි ඩොක් කළ පසු, Drp1 මයිටොකොන්ඩ්‍රියන්හි ශරීරය වටා සර්පිලාකාර ව්‍යුහයන් බවට ඔලිගොමරයිස් වන අතර පසුව මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් පිටත හා අභ්‍යන්තර පටලවල භෞතික කැපීම මධ්‍යස්ථ කිරීම සඳහා GTP ජලවිච්ඡේදනය මගින් ලබාගත් ශක්තිය භාවිතා කරයි [17]. එන්ඩොප්ලාස්මික් රෙටිකුලම්-ව්‍යුත්පන්න ටියුබල්, Drp1 ඔලිගොමරීකරණයට පෙර මයිටොකොන්ඩ්‍රියාවේ ආරම්භක සංකෝචනයක් ලෙස ක්‍රියා කරයි, සංකෝචනය නොවූ මයිටොකොන්ඩ්‍රියාව සම්පූර්ණ කරන ලද Drp1 සර්පිලාකාරයේ අවසර වට ප්‍රමාණයට වඩා පුළුල් බව හෙළිදරව් කිරීම අවධාරනය කරයි [12]. මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් විඛණ්ඩනයට පෙර ඇති ER-මයිටොකොන්ඩ්‍රියා අන්තර්ක්‍රියා සඳහාද Actin ගතිකත්වය වැදගත් වේ [24]. මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් විඛණ්ඩනයේ එහි භූමිකාවට අමතරව, Drp1 පෙරොක්සිසෝමවල විඛණ්ඩනය උත්ප්‍රේරණය කරයි [40].

ප්‍රෝටීන දෙකෙහිම N-පර්යන්ත GTPase වසමක්, ස්වයං-ඔලිගොමරීකරණය සඳහා තීරණාත්මක වන මධ්‍ය වසමක් සහ C-පර්යන්ත GTPase ප්‍රයෝගික වසම [1] අඩංගු වන බැවින් Drp31 හොඳින් සංලක්ෂිත ඩයිනමින් ප්‍රෝටීනයට බෙහෙවින් සමාන වේ. Drp1 එහි ප්‍රතිග්‍රාහක ප්‍රෝටීන් Mff සහ Fis1 සමඟ අන්තර්ක්‍රියා සංයෝගයක් හරහා මයිටොකොන්ඩ්‍රිය පටල සඳහා තෝරා ගැනීමේ හැකියාව ලබා ගන්නා අතර Drp1 [2] හි අද්විතීය B-ඇතුළු වසම හරහා මයිටොකොන්ඩ්‍රියා-විශේෂිත ෆොස්ෆොලිපිඩ් කාඩියොලිපින් සමඟ ඇති සම්බන්ධය හරහා. Drp1 සාමාන්‍යයෙන් සයිටොප්ලාස්මයේ homotetramer ලෙස පවතින අතර, මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් විඛණ්ඩන ස්ථානවල ඉහළ අනුපිළිවෙලෙහි එකලස් කිරීම Drp1 [3] හි මධ්‍ය වසම මගින් මැදිහත් වේ.

මයිටොකොන්ඩ්‍රිය ශ්‍රිතය සහ KEAP1-Nrf2-ARE මාර්ගය අතර ඇති ව්‍යංග සම්බන්ධය සැලකිල්ලට ගෙන, අපි මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් ව්‍යුහයට සහ ක්‍රියාකාරීත්වයට Nrf2 සක්‍රිය කිරීමේ බලපෑම් විමර්ශනය කළෙමු. SFN අනපේක්ෂිත ලෙස Nrf2 සහ KEAP1 යන දෙකෙන්ම ස්වායත්ත වන මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් හයිපර්ෆියුෂන් ප්‍රේරණය කරන බව අපි මෙහිදී පෙන්නුම් කරමු. SFN හි මෙම බලපෑම Drp1 ශ්‍රිතයේ නිෂේධනයක් හරහා වේ. Nrf2-ස්වාධීන වන ඇපොප්ටෝසිස් වලට SFN ප්‍රතිරෝධය ලබා දෙන බවත් Drp1 ක්ෂය වූ සෛලවල නිරීක්ෂණය කරන අනුකරණය කරන බවත් අපි තවදුරටත් පෙන්නුම් කරමු. මෙම දත්ත සාමූහිකව පෙන්නුම් කරන්නේ Nrf2 ස්ථායීකරණයට සහ සක්‍රිය කිරීමට අමතරව, SFN මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් ගතිකත්වය මොඩියුලේට් කරන අතර සෛලීය යෝග්‍යතාවය සහ පැවැත්ම ආරක්ෂා කරන බවයි.

ප්රතිපල

සල්ෆෝරාපේන් මයිටොකොන්ඩ්‍රියාවේ Nrf2/KEAP1-ස්වාධීන හයිපර්ෆියුෂන් ඇති කරයි

මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් ජාල ගතිකත්වය මත Nrf2 සක්‍රිය කිරීමේ බලපෑම අධ්‍යයනය කිරීමේදී, Nrf1 සංඥාවෙහි ප්‍රබල සක්‍රියකාරකයක් වන සල්ෆෝරාපේන් (SFN) සමඟ අමරණීය වූ, මානව දෘෂ්ටි විතානයේ වර්ණක එපිටිලියල් (RPE-2) සෛලවලට ප්‍රතිකාර කිරීම ශක්තිමත් විලයනයක් ඇති කරන බව අපි සොයා ගත්තෙමු. වාහන-ප්‍රතිකාර කළ පාලන සෛල සමඟ සසඳන විට මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් ජාලය (රූපය 1A සහ B). මෙම සෛලවල ඇති මයිටොකොන්ඩ්‍රියාවල රූප විද්‍යාව ප්‍රධාන මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් විඛණ්ඩන සාධකය වන අන්තරාසර්ග Drp1 හි siRNA මගින් ක්ෂය වූ සෛලවල ඇති මයිටොකොන්ඩ්‍රියාවට බෙහෙවින් සමාන විය (රූපය 1A). මෙම ප්‍රතිඵලය මගින් මයිටොකොන්ඩ්‍රිය විඛණ්ඩනය සහ විලයන තත්ත්වය සෛලයේ Nrf2 මට්ටම්වලට සෘජුවම ප්‍රතිචාර දක්වන බවට කුතුහලය දනවන අදහස මතු විය. කෙසේ වෙතත්, අනෙකුත් Nrf2 ස්ථායීකාරක සහ ප්‍රෝටීසෝම නිෂේධකය MG132, ප්‍රෝ-ඔක්සිකාරක tBHQ වැනි සක්‍රියකාරක සමඟ සෛල උත්තේජනය කිරීම හෝ Nrf2 නිෂේධකය KEAP1 තට්ටු කිරීම මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් විලයනය ඇති නොකරයි (රූපය 1A සහ B). මෙම උපාමාරු මගින් Nrf2 ස්ථායී කිරීම අන්තරාසර්ග Nrf2 සඳහා බටහිර බ්ලොටිං මගින් තහවුරු කරන ලදී (රූපය 1C). තවද, Nrf2 හි ප්‍රකාශනය SFN-ප්‍රේරිත මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් විලයනය සඳහා බෙදා හැරිය හැකි විය, මන්ද siRNA සමඟ ආවේණික Nrf2 තට්ටු කිරීම මෙම සංසිද්ධියට ප්‍රතිරෝධය දැක්වීමට අපොහොසත් විය (රූපය 1D,F). KEAP1 [2] හි cysteine ​​අවශේෂ සහසංයුජව වෙනස් කිරීම මගින් SFN KEAP1-Nrf21-ARE මාර්ගය උත්තේජනය කරන නිසා, SFN-ප්‍රේරිත මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් හයිපර්ෆියුෂන් KEAP1-රඳා පවතින නමුත් Nrf1 ස්වාධීන මාර්ගයක් හරහා උත්තේජනය කරන්නේද යන්න විසඳීමට අපි KEAP2 පහත දැමුවෙමු. කෙසේ වෙතත්, KEAP1 හි ක්ෂය වීම SFN-ප්‍රේරිත මයිටොකොන්ඩ්‍රිය විලයනය අවලංගු කිරීමට ද අසමත් විය (රූපය 1GI). ඇත්ත වශයෙන්ම, SFN විසින් KEAP1 ක්ෂය වීමෙන් ඇති කරන ලද විඛණ්ඩන ගැති රූප විද්‍යාව ආපසු හැරවිය (රූපය 1G, පැනලය b එදිරිව පැනලය d). මෙම ප්‍රතිඵලවලින් පෙන්නුම් කරන්නේ SFN ප්‍රතිකාරය මගින් කැනොනිකල් KEAP1-Nrf2-ARE මාර්ගයෙන් ස්වායත්තව මයිටොකොන්ඩ්‍රිය විලයනය ඇති වන අතර SFN සෘජුවම මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් විඛණ්ඩනයේ හෝ විලයන යන්ත්‍රවල කොටස්වලට බලපාන්නේද යන්න ප්‍රශ්න කිරීමට අපව යොමු කළේය.

Sulforaphane Drp1 හි මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් සංගමය අඩපණ කරයි

SFN-ප්‍රතිකාරය මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් අධි විභේදනය ඇති කරන බව සොයා ගැනීම මත පදනම්ව, මෙම සංසිද්ධිය අධික විලයන ක්‍රියාකාරකම්වල ප්‍රතිවිපාකයක් හෝ විඛණ්ඩන ක්‍රියාකාරකම් නිෂේධනයක් බව අපි තර්ක කළෙමු. මෙම විභවයන් දෙක අතර වෙනස හඳුනා ගැනීම සඳහා, අපි SFN තිබීම සහ නොමැති වීම තුළ පෙරොක්සිසෝමවල රූප විද්‍යාව සංසන්දනය කළෙමු. පෙරොක්සිසෝම මයිටොකොන්ඩ්‍රියා හා සමාන වන්නේ ඒවා ගතික ඉන්ද්‍රිය වන අතර ඒවායේ හැඩය සහ දිග නිරන්තරයෙන් ප්‍රවාහයේ පවතී [44]. පෙරොක්සිසෝම ඒවායේ පිටත පටලයේ Fis1 සහ Mff යන දෙකම අඩංගු වන අතර එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස Drp1-මැදිහත් විඛණ්ඩනය සඳහා ඉලක්ක වේ [22], [23]. කෙසේ වෙතත්, පෙරොක්සිසෝම මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් ජාලයේ විලයන යන්ත්‍ර භාවිතා නොකරන අතර එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස, විලයනය සිදු නොවේ [39]. ඒ වෙනුවට, පෙරොක්සිසෝම විඛණ්ඩනයට විරුද්ධ වන්නේ පටල සහ ප්‍රෝටීන එකතු කිරීම හරහා පවතින පෙරොක්සිසෝම දිගු කිරීමෙනි [44]. පෙරොක්සිසෝම වල Mfn1/2 සහ OPA1 නොමැති නිසා, අපි තර්ක කළේ SFN විඛණ්ඩන යන්ත්‍රෝපකරණ නිෂේධනය කරනවාට වඩා විලයන යන්ත්‍ර සක්‍රිය කරන්නේ නම්, පෙරොක්සිසෝම් දිගට බලපෑමක් ඇති නොවන බවයි. වාහන-ප්‍රතිකාර කරන ලද සෛල තුළ, පෙරොක්සිසෝම කෙටි, වටකුරු, පුන්ක්ටිෆෝම් ඉන්ද්‍රියයන් ලෙස පවත්වා ගෙන යනු ලැබේ (රූපය 2, පැනල් b සහ d). කෙසේ වෙතත්, SFN ප්‍රතිකාරය පාලන සෛල වලට සාපේක්ෂව පෙරොක්සිසෝම් දිග ~2 ගුණයකින් වැඩි විය (රූපය 2, පැනල් f සහ h). තවද, බොහෝ පෙරොක්සිසෝම මධ්‍යයට ආසන්නව ඇණ ගැසීම, විභව කැපුම් දෝෂයක් පෙන්නුම් කරයි (රූපය 2, පැනලය h, ඊතල තුඩු). එලෙසම, Drp1 siRNA සමඟ සම්ප්‍රේෂණය කරන ලද සෛලවල පෙරොක්සිසෝම අසාමාන්‍ය ලෙස දිගු විය (රූපය 2, පැනල් j සහ l), පෙරොක්සිසෝම විඛණ්ඩනය සඳහා Drp1 අවශ්‍ය බව සනාථ කරන අතර SFN-ප්‍රතිකාරය විඛණ්ඩන යන්ත්‍ර කඩාකප්පල් කිරීමෙන් මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් සහ පෙරොක්සිසෝම සංසිද්ධි ඇති කරන බව යෝජනා කරයි.

SFN Drp1 ශ්‍රිතය සීමා කරන ආකාරය අපි මීළඟට තීරණය කළෙමු. ප්‍රකාශන මට්ටම්වල අඩු කිරීම්, මයිටොකොන්ඩ්‍රියා හි බඳවා ගැනීම්/රඳවා ගැනීම, ඔලිගොමරීකරණය හෝ GTPase හි එන්සයිම ක්‍රියාකාරකම් ඇතුළත් විය. මේවායින් එකක හිඟයක් මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් විඛණ්ඩනය සහ අධි විඛණ්ඩනය අඩු වීමට හේතු වේ. අපි SFN-ප්‍රතිකාරයෙන් පසු Drp1 ප්‍රෝටීන් මට්ටම්වල ප්‍රතිනිෂ්පාදනය කළ හැකි වෙනස්කම් හඳුනා නොගත් අතර (Fig. 1C සහ 3A), එබැවින් SFN Drp1 ස්ථායීතාවය හෝ ප්‍රකාශනය වෙනස් නොකරන බව නිගමනය කළේ > 1 h [10] ක අර්ධ ආයු කාලයක් ඇති Drp50 ට අනුකූලවය. සහ අපගේ SFN ප්‍රතිකාර කෙටි කාලීන වේ. මීළඟට, අපි Drp1 මයිටොකොන්ඩ්‍රියාවට බඳවා ගැනීමට හෝ රඳවා ගැනීමට SFN බලපෑවේ දැයි විමර්ශනය කළෙමු. ඛණ්ඩනය අධ්‍යයනයෙන් පෙන්නුම් කළේ SFN විසින් මයිටොකොන්ඩ්‍රිය භාගයෙන් Drp1 හි අලාභයක් ඇති කළ බවයි (රූපය 3A, මංතීරු 7–8 සහ Fig. 3B). කලින් වාර්තා කළ පරිදි [43], සයිටොප්ලාස්මයේ බොහෝ එන්සයිම වාසය කරන ස්ථාවර තත්ත්‍වයේ දී ඕනෑම අවස්ථාවක මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් ජාලය සමඟ සම්බන්ධ වන්නේ Drp1 (~3%) හි සුළු කොටසක් පමණි (රූපය 3A, මංතීරු 5–8 ) SFN-ප්‍රතිකාරයෙන් පසු මයිටොකොන්ඩ්‍රියා-දේශීය, punctate Drp40 foci හි ~1% අඩුවීමක් පෙන්නුම් කරන සම-දේශීයකරණ විශ්ලේෂණය භාවිතයෙන් මෙම භාග දත්ත තහවුරු කරන ලදී (රූපය 3C සහ D). මෙම දත්ත එක්ව, SFN මගින් ප්‍රේරණය කරන ලද මයිටොකොන්ඩ්‍රිය විලයනය අවම වශයෙන් අර්ධ වශයෙන්, මයිටොකොන්ඩ්‍රියා සමඟ Drp1 දුර්වල වූ සම්බන්ධය හේතුවෙන් සිදු වන බව පෙන්නුම් කරයි. අන්තරාසර්ග Drp1 විශ්ලේෂණය සජීවී-සෛල අන්වීක්ෂයෙන් GTPase දෘශ්‍යමාන කිරීමට සුදුසු නොවූ බැවින් අපගේ දත්ත, Drp1 හි මයිටොකොන්ඩ්‍රිය රඳවා තබා ගැනීමට එදිරිව SFN මයිටොකොන්ඩ්‍රිය බඳවා ගැනීම්වලට බාධා කරන්නේද යන්න අතර වෙනස හඳුනා නොගනී.

Sulforaphane Nrf2 වලින් ස්වාධීනව Staurosportine-induced Apoptosis වලට එරෙහිව ආරක්ෂාව ලබා දෙයි

ඇපොප්ටෝසිස් අතරතුර Bax/Bak මගින් ජනනය කරන ලද පිටත මයිටොකොන්ඩ්‍රිය පටලයේ සිදුරු සෑදීමේදී මයිටොකොන්ඩ්‍රිය විඛණ්ඩනයට අවසර ඇති බව පෙර කෘතීන් පෙන්වා දී ඇත [11]. Drp1 ඇපොප්ටෝසිස් අතරතුර මයිටොකොන්ඩ්‍රියා වෙත තෝරාගෙන බඳවා ගන්නා බව පෙන්වා දී ඇත [11] සහ මෙයට අනුකූලව, ක්‍රියාවලියේ මුල් අවධියේදී ඛණ්ඩනය වූ මයිටොකොන්ඩ්‍රියා නිරීක්ෂණය කර ඇත [27]. ප්‍රතිවිරුද්ධව, මයිටොකොන්ඩ්‍රිය විඛණ්ඩනය නිෂේධනය කිරීම සයිටොක්‍රොම් සී මුදා හැරීමට ඉඩ සලසන බාහිර පටල සිදුරු සෑදීම අවහිර කිරීමෙන් ඇපොප්ටෝසිස් වළක්වනු ඇතැයි සැලකේ [53]. ඒ අනුව, මයිටොකොන්ඩ්‍රිය විලයනය උත්තේජනය කිරීම ස්ටෝරොස්පොරින් (STS) [14] ඇතුළු සංයෝග මගින් ප්‍රේරිත ඇපොප්ටෝසිස් ප්‍රගතිය ප්‍රමාද කරයි. SFN RPE-1 සෛල STS-මැදිහත් වූ ඇපොප්ටෝසිස් වලින් ආරක්ෂා කරන්නේද යන්න තීරණය කිරීම සඳහා සහ එසේ නම්, මෙයට Nrf2 අවශ්‍යද යන්න තීරණය කිරීම සඳහා, අපි සක්‍රීය කැස්පේස්-3 උපස්ථරයක් වන පොලි ADP රයිබෝස් පොලිමරේස් (PARP) ඛණ්ඩනය පහසුවෙන් ප්‍රේරණය කිරීමට විශ්ලේෂණයක් ස්ථාපිත කළෙමු. ඇපොප්ටෝසිස්. RPE-1 සෛල 1 -M STS සමඟ පැය 6ක් සඳහා ප්‍රතිකාර කිරීම PARP හි ඉතා මධ්‍යස්ථ බෙදීමක් පමණක් ඇති කළ නමුත් SFN සම-ප්‍රතිකාර මගින් මෙය වළක්වා ඇත (උදා: Fig. 4A, 3 ට එරෙහිව 4). මෙම විශ්ලේෂණයේ ශක්තිමත් බව වැඩි කිරීම සඳහා, අපි සෛල වලට STS-ප්‍රේරිත ඇපොප්ටෝසිස් වලට තවදුරටත් සංවේදී කළේ, ඇපොප්ටොටික් විරෝධී සාධකය වන Bcl-XL ඉලක්ක කරගනිමින් siRNA සමඟ පූර්ව ප්‍රතිකාර කිරීමෙනි. මෙම පූර්ව ප්‍රතිකාරය Bcl-XL හි ප්‍රකාශනය අඩු කළ අතර STS වෙත නිරාවරණය වන කාල ශ්‍රිතයක් ලෙස PARP කැඩීම කැපී පෙනෙන ලෙස ප්‍රවර්ධනය කළේය (රූපය 4B, මංතීරු 2 සහ මංතීරු 4-10 දක්වා සසඳන්න). වැදගත් කරුණක් නම්, SFN සමඟ පූර්ව ප්‍රතිකාරයේ පැය 2ක් STS වලට නිරාවරණය වන සෛලවල PARP බෙදීම අවම කර ඇත (රූපය 4C, මංතීරුව 3 එදිරිව 4 සහ පටුමග 5 එදිරිව 6). එලෙසම, CRISPR/Cas2 මගින් Nrf9 ස්ථායීව ක්ෂය කරන ලද සෛල SFN පූර්ව-ප්‍රතිකාර මගින් STS විෂ වීමෙන් සංසන්දනාත්මකව ආරක්ෂා කරන ලදී (රූපය 4C, මංතීරුව 11 එදිරිව 12 සහ මංතීරුව 13 එදිරිව 14 සහ Fig. 4D). PARP ඛණ්ඩනය (රූපය 4C සහ D) සහ සෛල රූප විද්‍යාව (Fig. 4E) යන දෙකම කියවීම් ලෙස භාවිතා කරමින් මෙම ආරක්ෂාව නිරීක්ෂණය කරන ලදී. CRISPR/Cas2 මගින් Nrf9 ක්ෂය වීමේ කාර්යක්ෂමතාවය බටහිර blotting මගින් තහවුරු කරන ලදී (Fig. 4C, Nrf2 blot). පුරෝකථනය කළ පරිදි, Drp1 හි සෛල ක්ෂය වීම, එය අධි විසර්ජන සංසිද්ධියක් ද ලබා දෙයි (රූපය 1A), SFN (පය. 4F සහ G) සමඟ සංසන්දනය කරන ලද පාලන සෛල හා සසඳන විට STS වලට ප්‍රතිචාර වශයෙන් PARP කැඩීම අවහිර කරන ලදී. මෙම සොයාගැනීම් එක්ව, Nrf1 ස්ථායීකරණයෙන් සහ සක්‍රිය කිරීමෙන් ස්වායත්තව, Drp2 ශ්‍රිතය සීමා කිරීමට ඇති හැකියාව හරහා ඇපොප්ටෝසිස් වලට එරෙහිව ආරක්ෂාව ලබා දෙන SFN සමඟ අනුකූල වේ.

සාකච්ඡා

SFN විසින් KEAP1-Nrf2-ARE මාර්ගය මත එහි බලපෑමෙන් ස්වාධීනව මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් විඛණ්ඩනය/විලයන ගතිකත්වය මොඩියුලේට් කරන බව අපි සොයා ගත්තෙමු. මයිටොකොන්ඩ්‍රියා අක්‍රියතාව සහ ROS නිෂ්පාදනය අතර උපකල්පිත සම්බන්ධයක් සහ Nrf2 සක්‍රිය කිරීම හරහා මයිටොකොන්ඩ්‍රියා-ව්‍යුත්පන්න නිදහස් රැඩිකලුන් මිරිකීමේ අවශ්‍යතාවය නිසා මෙය කුතුහලය දනවන කරුණකි. පුරස්ථි ග්‍රන්ථි පිළිකා, බාධාකාරී පෙනහළු රෝග සහ දෑකැති සෛල රෝග ඇතුළු විවිධ රෝග සඳහා ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා දැනට SFN පරීක්‍ෂා කරමින් පවතින සායනික අත්හදා බැලීම් 30කට වඩා වැඩි ප්‍රමාණයකට අනුව SFN හි මෙම අතිරේක ක්‍රියාකාරී බලපෑම විභව වැදගත් වේ [7], [10], [ 47].

SFN isothiocyanate [56] සහ එය Nrf2 පරිහානිය [1] මැඩපැවැත්වීම සඳහා තීරණාත්මක KEAP2 cysteines සෘජුවම ඇක්සිලේට් කිරීම මගින් Nrf21 සංඥා සක්‍රීය කරයි [XNUMX], එය අනුගමනය කරන්නේ SFN විඛණ්ඩනය හෝ විලයන සාධකයේ ක්‍රියාකාරිත්වය වෙනස් කිරීම මගින් එහි ගැති විලයන බලපෑම් සිදු කරන බවයි. . අපගේ දත්ත Drp1 SFN මගින් ඍණාත්මක ලෙස නියාමනය කිරීමට දැඩි ලෙස සහාය දක්වයි, නමුත් GTPase සෘජුවම ඇසිලේෂන් ඉලක්කයක් ද යන්න පැහැදිලි කිරීමට ඉතිරිව ඇත. මෙම දැනුමේ පරතරය තිබියදීත්, SFN ප්‍රතිකාරයට ප්‍රතිචාර වශයෙන් මයිටොකොන්ඩ්‍රියා සහ පෙරොක්සිසෝම දෙකම හයිපර්ෆියුස් වන බැවින් Drp1 හි ක්‍රියාකාරිත්වය පැහැදිලිවම SFN මගින් සම්මුතියකට ලක් වේ. මීට අමතරව, SFN මගින් මයිටොකොන්ඩ්‍රියාවේ ස්ථානගත වන සහ සමුච්චය වන Drp1 ප්‍රමාණය අඩු කරයි (රූපය. 3). අපගේ අත්හදා බැලීම් සියලුම ආවේණික ප්‍රෝටීන සමඟ සිදු කර ඇති නිසා, මයිටකොන්ඩ්‍රියල් විඛණ්ඩන ස්ථානවල Drp1 හඳුනා ගැනීම ස්ථාවර තත්ත්‍වයේ පවතින අතර, ඒ අනුව, SFN මගින් ඇති කරන එන්සයිමයේ රඳවා ගැනීමේ දෝෂයකට එරෙහිව බඳවා ගැනීම් අතර වෙනස හඳුනා ගත නොහැක. තවද, Drp1 බඳවා ගැනීම් අවහිර කිරීමට SFN මගින් මයිටොකොන්ඩ්‍රියා (Fis1 හෝ Mff) හි ප්‍රතිග්‍රාහකයක් ඇසිලේට් කිරීමේ හැකියාව අපට ඉවත් කළ නොහැක, Drp1 සෘජුවම වෙනස් කර ඇති බවට අපි සැක කරමු. Drp1 හි සිස්ටයින් නවයක් ඇත, ඉන් අටක් ඔලිගොමරීකරණය සඳහා අවශ්‍ය මධ්‍ය වසම තුළ වාසය කරයි [3], සහ ඉන් එකක් Drp1 හි C-පර්යන්තයේ GTPase Effector Domain (GED) හි වාසය කරයි. මෙම cysteine ​​වලින් ඕනෑම එකක සෘජු ඇසිලේෂන් Drp1 හි ක්‍රියාකාරකම් දෝෂයක් ඇති කළ හැකි අතර එම නිසා මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් ගතිකත්වය මත SFN හි බලපෑම යටපත් වේ. කැපී පෙනෙන ලෙස, පූර්ව වැඩවලින් පෙනී යන්නේ ඔලිගොමරීකරණයේ සහ උත්ප්‍රේරක ක්‍රියාකාරකම්වල දෝෂයන් මයිටොකොන්ඩ්‍රියා [1] හි Drp52 රඳවා තබා ගැනීම අවලංගු කළ හැකි බවයි. GED වසමෙහි Cys644 විශේෂයෙන් ආකර්ෂණීය ඉලක්කයක් වන්නේ මෙම සිස්ටීන් ෆීනොකොපිවල විකෘතිය Drp1 GTPase ක්‍රියාකාරකම් වලට බාධා කරන [4] විකෘති කිරීම් සහ මෙම විශේෂිත cysteine ​​thiol-ප්‍රතික්‍රියාශීලී ඉලෙක්ට්‍රොෆයිල් [9] මගින් වෙනස් කරන බව පෙන්නුම් කරන පෙර වැඩ මත පදනම් වූවකි. මෙම කැපී පෙනෙන ප්‍රශ්නය විසඳීම සඳහා ස්කන්ධ වර්ණාවලිමිතික වලංගුකරණය අවශ්‍ය වනු ඇත. සාරාංශයක් ලෙස, අපි සායනිකව අදාළ සංයෝගය SFN සඳහා නව, සයිටොප්‍රොටෙක්ටිව් ශ්‍රිතයක් හඳුනාගෙන ඇත. ප්‍රධාන ප්‍රති-ඔක්සිකාරක පිටපත් කිරීමේ සාධකය Nrf2 සක්‍රිය කිරීමට අමතරව, SFN මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් සහ පෙරොක්සිසෝමල් විලයනය ප්‍රවර්ධනය කරන අතර මෙම බලපෑම Nrf2 වෙතින් ස්වාධීන වේ. මෙම සංසිද්ධියට යටින් පවතින යාන්ත්‍රණයට මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් සහ පෙරොක්සිසෝමල් විඛණ්ඩනයේ ප්‍රාථමික මැදිහත්කරු වන GTPase Drp1 හි ක්‍රියාකාරිත්වය අඩු කිරීම ඇතුළත් වේ. SFN-මැදිහත් වූ මයිටොකොන්ඩ්‍රිය විලයනයේ ප්‍රධාන ප්‍රතිවිපාකයක් වන්නේ ඇපොප්ටෝසිස් ප්‍රේරක ස්ටවුරොස්පොරින් වල විෂ සහිත බලපෑම් වලට සෛල ප්‍රතිරෝධී වීමයි. SFN හි මෙම අතිරේක සයිටොප්‍රොටෙක්ටිව් ක්‍රියාව වයස ප්‍රමුඛ අවදානම් සාධකය වන ස්නායු විකෘතිතා රෝග රාශියකට විශේෂ සායනික ප්‍රයෝජනයක් විය හැකිය (උදා: පාකින්සන් රෝගය, ඇල්සයිමර් රෝගය, වයසට සම්බන්ධ අක්ෂි පරිහානිය) මෙම රෝග ඇපොප්ටෝසිස් සමඟ සම්බන්ධ වී ඇති අතර අඩු වේ. මට්ටම් සහ/හෝ Nrf2 [35], [36], [48] අක්‍රමිකතා.

ද්රව්ය සහ ක්රම

ඇපොප්ටෝසිස් විශ්ලේෂණය

පහත දැක්වෙන පරිදි සෛල බීජ කර siRNA සමඟ මාරු කරන ලදී. මයිටොකොන්ඩ්‍රිය විලයනය ඇති කිරීම සඳහා සෛල 50 ?M sulforaphane සමඟ පැය 2කට පෙර ප්‍රතිකාර කරන ලද අතර පසුව ඇපොප්ටෝසිස් ඇති කිරීම සඳහා 1 ?M ස්ටෝරොස්පොරින් සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලදී. අස්වැන්න නෙළන අවස්ථාවේදී, මාධ්‍ය තනි නල වල එකතු කර පෙති ඇපොප්ටෝටික් සෛල වෙත අධිවේගී කේන්ද්‍රාපසාරීකරණයට ලක් කරන ලදී. මෙම සෛල පෙති ඇලෙනසුලු සෛල සමඟ ඒකාබද්ධ කර 2 වරක් සාන්ද්‍රිත Laemmli බෆරය තුළ ද්‍රාව්‍ය කරන ලදී. සාම්පල PARP විරෝධී බටහිර බ්ලොටිං වලට ලක් කරන ලදී.

CRISPR/Cas9 ඉදිකිරීම් උත්පාදනය

LentiCRISPR/eCas9 1.1 නිර්මාණය කිරීමට, LentiCRISPR v2 (addgene #52961) පළමුව Age1 සහ BamH1 සමඟ කපා ඇත. මීළඟට, eSpCas9 9 (addgene #1.1) වෙතින් SpCas71814 පහත ප්‍රයිමර් භාවිතා කරමින් Age1 සහ BamH1 overhangs සමඟ PCR විස්තාරණය කරන ලදී (ඉදිරියට AGCGCACCGGTTCTAGAGCGCTGCCACACATGGACTATAAGGACCACGAT, ඉහතින් GATCGTCGTT කපා. Benchling.com භාවිතා කිරීමෙන් sgRNA අනුපිළිවෙල තීරණය කරන ලදී. ඉහළම ඉලක්කගත සහ අඩුම ඉලක්කගත ලකුණු සහිත කේතීකරණ අනුපිළිවෙල ඉලක්ක කිරීමට පරාමිති සකසා ඇත. පහත සඳහන් අනුපිළිවෙල (අනුපිළිවෙල ඉලක්ක අවධාරනය කලේය, HS sgNFE2L2 # 1 අර්ථයෙන් CACCGCGACGGAAAGAGTATGAGC, antisense AAACGCTCATACTCTTTCCGTCGC; HS sgNFE2L2 # 2 අර්ථයෙන් CACCGGTTTCTGACTGGATGTGCT, antisense AAACAGCACATCCAGTCAGAAACC; HS sgNFE2L2 # 3 අර්ථයෙන් CACCGGAGTAGTTGGCAGATCCAC, antisense AAACGTGGATCTGCCAACTACTCC) BsmB1 බවට ෙමෙළඟු හා ligated ලදී LentiCRISPR / eCas9 1.1 කපා ඉවත් කරන්න. Lentivirally ආසාදිත RPE-1 සෛල puromycin සමඟ තෝරාගෙන සංචිත ජනගහනයක් ලෙස පවත්වා ගෙන යනු ලැබේ. Immunofluorescence සහ western blotting මගින් Knockout තහවුරු විය.

සෛල සංස්කෘතිය සහ මාරුවීම්

ටෙලෝමරේස් (RPE-1) (ATCC) සමඟ පරිවර්තනය කරන ලද මානව දෘෂ්ටි විතානයේ වර්ණක අපිච්ඡද සෛල, පෙනිසිලින්, ස්ට්‍රෙප්ටොමයිසින්, 1X අත්‍යවශ්‍ය නොවන ඇමයිනෝ අම්ල (Life cocknoine අම්ලය) සමඟ පරිපූරණය කරන ලද 1 g/L ග්ලූකෝස් අඩංගු Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) හි වගා කරන ලදී. සහ 10% Fetal Bovine Serum (Life Technologies). siRNA මාරු කිරීම් සඳහා, 30,000–35,000 සෛල/mL එක රැයකින් බීජ කරන ලදී. සෛල 10 nM siRNA ලබා ගත් අතර, සෙරුමය-නිදහස් DMEM හි තනුක කර 0.3% Interferin transfection reagent (PolyPlus) සමඟ ඒකාබද්ධ විය. ඇපොප්ටෝසිස් සංවේදීතාව සඳහා, සෛලවලට 1 nM Bcl-XL siRNA ලැබුණි. සෛල මාරු කිරීමෙන් පසු දින 2-3 කට පසු අස්වනු නෙලනු ලැබේ.

රසායනික ද්රව්ය, ප්රතිදේහ සහ siRNA ඔලිගෝස්

?-tubulin (සෛල සංඥා), ?-tubulin (Sigma), Drp1 (BD Biosciences), KEAP1 (Proteintech), Lamin B1 (Abcam), PARP (Cell Signaling), PMP70 (Abcam) සහ Tom20 (BD Biosciences) වලට එරෙහි ප්‍රතිදේහ ) 1:1000 තනුක වලදී western blotting සහ immunofluorescence සඳහා භාවිතා කරන ලදී. ගෘහස්ථ, ප්‍රති-Nrf2 හාවා ප්‍රතිදේහය 1:2000 ට බටහිර බ්ලොටින් සඳහා භාවිතා කරන ලදී [34], [59]. Sulforaphane (Sigma) සහ staurosporine (Tocris) පිළිවෙළින් 50 ?M සහ 1 ?M භාවිතා කරන ලදී. Drp1 (Dharmacon), Nrf2 (Dharmacon), KEAP1 (Cell Signaling) සහ Bcl-XL (Cell Signaling) වලට එරෙහිව siRNAs වෙනත් ආකාරයකින් සටහන් කර නොමැති නම් 10 nM දී භාවිතා කරන ලදී.

Immunofluorescence සහ Vivo ලේබල් කිරීම

මිලිමීටර් 18 වීදුරු ආවරණ මත බීජ කරන ලද සෛල වාහනයක් හෝ ඖෂධයක් සමඟ ප්‍රතිකාර කර, 3.7% formaldehyde හි සවි කර, පසුව 0.2% ට්‍රයිටන් X-100/PBS හි අයිස් මත විනාඩි 10ක් පාරගම්ය කර ඇත. ප්‍රාථමික ප්‍රතිදේහ 3% bovine serum albumin (BSA) හි PBS හි රාත්‍රියේ 4 ° C දී පුර්වගත කරන ලදී. PBS සේදීමෙන් පසුව, සෛල විශේෂ-සුදුසු, Alexa1- හෝ Alexa488-, සංයෝජන ද්විතියික ප්‍රතිදේහ (546:1 තනුක) සහ 1000 ?g/mL DAPI (Sigma) 0.1% BSA/PBS හි පැය 3ක් සඳහා පුර්වගත කරන ලදී. මයිටොකොන්ඩ්‍රියා ප්‍රති-ටොම් 20 ප්‍රතිශක්ති ප්‍රතිදීප්තියෙන් හෝ 200 nM MitoTracker Red CMXRos (Molecular Probes, Inc.) හි සෛල පුර්වීකරණය කිරීමෙන්, සවි කිරීමට පෙර 30 −C දී සෙරුමය-නිදහස් DMEM හි විනාඩි 37 ක් දෘශ්‍යමාන කරන ලදී.

අන්වීක්ෂය සහ රූප විශ්ලේෂණය

Immunofluorescence සාම්පල LSM710 Confocal අන්වීක්ෂයකින් (Carl Zeiss) නරඹන ලදී. 63X හෝ 100X තෙල් ගිල්වීමේ අරමුණු භාවිතයෙන් ක්ෂුද්‍ර ග්‍රැෆි ග්‍රහණය කර ඇති අතර Adobe Photoshop CS6 භාවිතයෙන් රූප සකස් කර වැඩි දියුණු කරන ලදී. සාම්පලවල අනන්‍යතාවයට අන්ධව සිටියදී අතින් සකස් කරන ලද එළිපත්ත සහිත Carl Zeiss LSM710 සම-දේශීයකරණ විශේෂාංගය භාවිතයෙන් සම-දේශීයකරණ විශ්ලේෂණය සිදු කරන ලදී. වෙනත් ආකාරයකින් දක්වා නොමැති නම්, පුරා පරිමාණ තීරු මීටර් 10 කි. මයිටොකොන්ඩ්‍රිය රූප විද්‍යාව අන්ධ ලකුණු කිරීම මගින් තක්සේරු කරන ලදී. සෛලයක මයිටොකොන්ඩ්‍රියාව බහු, වටකුරු, වෙනස් කොට සලකන පුන්ක්ටා ලෙස පවත්වා ගෙන ගියහොත්, සෛලය "විඛණ්ඩනය" ලෙස ලකුණු කර ඇත. තනි මයිටොකොන්ඩ්‍රියා වෙන්කර හඳුනාගත නොහැකි නම් සහ මුළු මයිටොකොන්ඩ්‍රිය ජාලයම අඛණ්ඩව දිස් වූයේ නම්, සෛලය "විලයන" ලෙස ලකුණු කර ඇත. මයිටොකොන්ඩ්‍රියා පොකුරු සහිත සෛල ඇතුළුව අනෙකුත් සියලුම සෛල "අතරමැදි" ලෙස ලකුණු කර ඇත.

උප සෛලීය කොටස්

RPE-1 සෛල එකමුතුව දක්වා වර්ධනය විය. PBS සේදීමකින් පසුව, සෛල විනාඩි 600ක් සඳහා 10°g දී කේන්ද්‍රාපසාරණයට ලක් කර 600 ?L හුදකලා බෆරයකින් (210 mM මැනිටෝල්, 70 mM සුක්‍රෝස්, 5 mM MOPS, 1 mM EDTA pH 7.4+1 mM PMSF) නැවත ලබා දෙන ලදී. අත්හිටුවීම Dounce homogenizer එකක 30 වතාවක් lysed කර ඇත. සමජාතීයතාවයෙන් කොටසක් සම්පූර්ණ සෛල ලයිසේට් ලෙස සංරක්ෂණය කරන ලදී. ඉතිරිව ඇති න්‍යෂ්ටීන් සහ ලයිස් නොකළ සෛල ඉවත් කිරීම සඳහා සුපර්නැටන්ට් මිනිත්තු 800 ක් සඳහා ග්‍රෑම් 10 ක කේන්ද්‍රාපසාරීයකට ලක් කරන ලදී. මයිටොකොන්ඩ්‍රියා පෙති වෙත මිනිත්තු 1500ක් සඳහා මෙම අධි ප්‍රවාහය ග්‍රෑම් 10 ක කේන්ද්‍රාපසාරීයකට ලක් කරන ලදී. අධි ප්‍රවාහය "සයිටොසොලික් භාග" ලෙස සංරක්ෂණය විය. පෙති PBS සමඟ මෘදු ලෙස සෝදා හුදකලා බෆරයේ නැවත ලබා දෙන ලදී. එක් එක් කොටසෙහි ප්‍රෝටීන් සාන්ද්‍රණය bicinchoninic අම්ලය (BCA) විශ්ලේෂණය මගින් මනිනු ලබන අතර ඊට සමාන ප්‍රෝටීන් ප්‍රමාණයක් SDS-PAGE මගින් විසඳා ඇත.

බස්නාහිර පුල්ලි

සෛල PBS වලින් සෝදා 2 ගුණයක් සාන්ද්‍රිත Laemmli ද්‍රාව්‍ය කරන බෆරය (100 mM Tris [pH 6.8], 2% SDS, 0.008% බ්‍රොමොෆෙනෝල් නිල්, 2% 2-mercaptoethanol, 26.3% Glycerol, සහ 0.001.rin5%) ද්‍රාව්‍ය කරන ලදී. සෝඩියම් ඩොඩෙසයිල් සල්ෆේට් (SDS) පොලිඇක්‍රිලමයිඩ් ජෙල් මත පැටවීමට පෙර ලයිසේට් විනාඩි 1 ක් තම්බා ඇත. ප්‍රෝටීන නයිට්‍රොසෙලියුලෝස් පටල වෙත මාරු කරන ලද අතර 5% කිරි/TBST හි 5 h සඳහා පටල අවහිර කරන ලදී. ප්‍රාථමික ප්‍රතිදේහ 4% කිරි/TBST වල තනුක කර 5 ° C දී එක රැයකින් බ්ලට් සමඟ පුර්වගත කරන ලදී. Horseradish peroxidase (HRP) - සංයෝජන ද්විතියික ප්රතිදේහ XNUMX% කිරි / TBST තනුක කර ඇත. වැඩි දියුණු කරන ලද රසායන විද්‍යාවෙන් බ්ලොට් සකස් කරන ලද අතර ImageJ මෘදුකාංගය භාවිතයෙන් densitometric ප්‍රමාණකරණය සිදු කරන ලදී.

සල්ෆෝරාපේන් යනු බ්‍රොකොලි, ගෝවා, වට්ටක්කා, ගෝවා සහ කරපටි ඇතුළු කුරුස එළවළු වලින් ලබා ගන්නා කාබනික සල්ෆර් ද්‍රව්‍යවල අයිසොතියෝසයනේට් එකතුවේ රසායනිකයකි. myrosinase එන්සයිමය Glucoraphanin, glucosinolate, sulforaphane බවට පරිවර්තනය කරන විට Sulforaphane නිපදවයි, එය sulforaphane-glucosinolate ලෙසද හැඳින්වේ. බ්‍රොකොලි පැළ සහ වට්ටක්කා වල ග්ලූකෝරෆනින් ඉහළම සාන්ද්‍රණය හෝ සල්ෆෝරාපේන් වල පූර්වගාමියා ඇත. විවිධ සෞඛ්‍ය ගැටළු වළක්වා ගැනීම සඳහා සල්ෆෝරාපේන් මිනිස් සිරුරේ ප්‍රතිඔක්සිකාරක හැකියාවන් වැඩි දියුණු කරන බව පර්යේෂණ අධ්‍යයනයන් මගින් පෙන්නුම් කර ඇත. ආචාර්ය ඇලෙක්ස් ජිමිනෙස් ඩීසී, සීසීඑස්ටී ඉන්සයිට්

සල්ෆෝරාපේන් සහ පිළිකා, මරණ, වයස්ගත වීම, මොළය සහ හැසිරීම, හෘද රෝග සහ තවත් දේ කෙරෙහි එහි බලපෑම්

Isothiocyanates යනු ඔබේ ආහාර වේලට ලබා ගත හැකි වැදගත්ම ශාක සංයෝග කිහිපයකි. මෙම වීඩියෝවෙන් මම ඔවුන් සඳහා මෙතෙක් කර ඇති වඩාත්ම සවිස්තරාත්මක නඩුව ඉදිරිපත් කරමි. කෙටි අවධානයක්? පහත කාල ලක්ෂ්‍යවලින් එකක් ක්ලික් කිරීමෙන් ඔබේ ප්‍රියතම මාතෘකාව වෙත යන්න. සම්පූර්ණ කාලසටහන පහතින්.

ප්රධාන කොටස්:

• 00:01:14 - පිළිකා සහ මරණ
• 00:19:04 - වයසට යාම
• 00:26:30 - මොළය සහ හැසිරීම
• 00:38:06 - අවසාන නැවත බැලීම
• 00:40:27 - මාත්රාව

සම්පූර්ණ කාලරේඛාව:

• 00:00:34 - වීඩියෝවේ ප්‍රධාන අවධානයක් වන සල්ෆෝරාපේන් හඳුන්වාදීම.
• 00:01:14 - කුරුස එළවළු පරිභෝජනය සහ සියලු හේතු මරණ අනුපාතය අඩු කිරීම.
• 00:02:12 - පුරස්ථි පිළිකා අවදානම.
• 00:02:23 - මුත්රාශයේ පිළිකා අවදානම.
• 00:02:34 - දුම් පානය කරන්නන්ගේ පෙනහළු පිළිකා අවදානම.
• 00:02:48 - පියයුරු පිළිකා අවදානම.
• 00:03:13 - උපකල්පිත: ඔබට දැනටමත් පිළිකාවක් ඇත්නම් කුමක් කළ යුතුද? (මැදිහත්වීමේ)
• 00:03:35 - පිළිකා සහ මරණ අනුබද්ධ දත්ත මෙහෙයවන පිළිගත හැකි යාන්ත්‍රණය.
• 00:04:38 - Sulforaphane සහ පිළිකා.
• 00:05:32 - මීයන්ගේ මුත්‍රාශයේ ගෙඩි වර්ධනයට බ්‍රොකොලි පැළ නිස්සාරණයේ ප්‍රබල බලපෑමක් පෙන්නුම් කරන සත්ව සාක්ෂි.
• 00:06:06 - පුරස්ථි ග්‍රන්ථියේ පිළිකා රෝගීන් සඳහා සල්ෆෝරාපේන් සෘජුවම ලබා දීමේ බලපෑම.
• 00:07:09 - සැබෑ පියයුරු පටක වල isothiocyanate පරිවෘත්තීය ජෛව සමුච්චනය.
• 00:08:32 - පියයුරු පිළිකා ප්‍රාථමික සෛල නිෂේධනය කිරීම.
• 00:08:53 - ඉතිහාස පාඩම: පුරාණ රෝමයේ පවා බ්‍රැසිකා සෞඛ්‍ය ගුණාංග ඇති බව තහවුරු විය.
• 00:09:16 - පිළිකා කාරක බැහැර කිරීම (බෙන්සීන්, ඇක්‍රොලීන්) වැඩි දියුණු කිරීමට සල්ෆෝරාපේන්ගේ හැකියාව.
• 00:09:51 - NRF2 ප්‍රතිඔක්සිකාරක ප්‍රතිචාර මූලද්‍රව්‍ය හරහා ජානමය ස්විචයක් ලෙස.
• 00:10:10 - NRF2 සක්‍රිය කිරීම glutathione-S-conjugates හරහා පිළිකා කාරක පිටකිරීම වැඩි දියුණු කරන ආකාරය.
• 00:10:34 - Brussels sprouts glutathione-S-transferase වැඩි කරන අතර DNA හානි අඩු කරයි.
• 00:11:20 - Broccoli sprout පානය බෙන්සීන් බැහැර කිරීම 61% කින් වැඩි කරයි.
• 00:13:31 – Broccoli sprout homogenate ඉහළ ශ්වසන මාර්ගයේ ප්‍රතිඔක්සිකාරක එන්සයිම වැඩි කරයි.
• 00:15:45 - කුරුස එළවළු පරිභෝජනය සහ හෘද රෝග මරණ.
• 00:16:55 - බ්‍රොකොලි පැළ කුඩු 2 වර්ගයේ දියවැඩියා රෝගීන්ගේ රුධිර ලිපිඩ සහ සමස්ත හෘද රෝග අවදානම වැඩි දියුණු කරයි.
• 00:19:04 - වයසට යාමේ අංශයේ ආරම්භය.
• 00:19:21 - සල්ෆෝරාපේන් බහුල ආහාර කුරුමිණියන්ගේ ආයු කාලය 15 සිට 30% දක්වා වැඩි කරයි (ඇතැම් තත්වයන් යටතේ).
• 00:20:34 - දිගුකාලීන පැවැත්ම සඳහා අඩු දැවිල්ලක වැදගත්කම.
• 00:22:05 - කුරුස එළවළු සහ බ්රොකොලි පැළ කුඩු මිනිසුන් තුළ විවිධාකාර ගිනි අවුලුවන සලකුණු අඩු කරන බව පෙනේ.
• 00:23:40 - මැද-වීඩියෝ නැවත බැලීම: පිළිකා, වයස්ගත කොටස්
• 00:24:14 - මවුස් අධ්‍යයනයන් යෝජනා කරන්නේ සල්ෆෝරාපේන් මහලු වියේදී අනුවර්තන ප්‍රතිශක්තිකරණ ක්‍රියාකාරිත්වය වැඩි දියුණු කළ හැකි බවයි.
• 00:25:18 - සල්ෆෝරාපේන් තට්ටය දැමීමේ මූසික ආකෘතියක හිසකෙස් වර්ධනය වැඩි දියුණු කළේය. පින්තූරය 00:26:10 ට.
• 00:26:30 - මොළයේ සහ හැසිරීම් අංශයේ ආරම්භය.
• 00:27:18 - ඔටිසම් මත බ්රොකොලි පැළ සාරය බලපෑම.
• 00:27:48 - භින්නෝන්මාදය මත ග්ලූකෝරෆනින් වල බලපෑම.
• 00:28:17 - අවපාත සාකච්ඡාවේ ආරම්භය (පිළිගත හැකි යාන්ත්රණය සහ අධ්යයන).
• 00:31:21 – ආතති-ප්‍රේරිත මානසික අවපීඩනයේ විවිධ මාදිලි 10 ක් භාවිතා කරමින් මූසික අධ්‍යයනය සල්ෆෝරාපේන් ෆ්ලෝක්සෙටීන් (ප්‍රෝසාක්) හා සමානව ඵලදායී බව පෙන්වයි.
• 00:32:00 - අධ්‍යයනයෙන් පෙන්නුම් කරන්නේ මීයන් තුළ ග්ලූකෝරෆනින් සෘජුවම ශරීරගත වීම සමාජ පරාජයේ ආතති ආකෘතියෙන් මානසික අවපීඩනය වැළැක්වීමට සමානව ඵලදායී බවයි.
• 00:33:01 - neurodegeneration අංශයේ ආරම්භය.
• 00:33:30 - සල්ෆෝරාපේන් සහ ඇල්සයිමර් රෝගය.
• 00:33:44 - සල්ෆෝරාපේන් සහ පාකින්සන් රෝගය.
• 00:33:51 - Sulforaphane සහ Hungtington's රෝගය.
• 00:34:13 - Sulforaphane තාප කම්පන ප්රෝටීන වැඩි කරයි.
• 00:34:43 - කම්පන සහගත මොළයේ තුවාල අංශයේ ආරම්භය.
• 00:35:01 - TBI මතකය වැඩි දියුණු කළ වහාම Sulforaphane එන්නත් කිරීම (මූසික අධ්යයනය).
• 00:35:55 ​​- Sulforaphane සහ නියුරෝන ප්ලාස්ටික්.
• 00:36:32 - සල්ෆෝරාපේන් මීයන් තුළ II වර්ගයේ දියවැඩියා ආකෘතියේ ඉගෙනීම වැඩි දියුණු කරයි.
• 00:37:19 - Sulforaphane සහ duchenne මස්කියුලර් ඩිස්ට්‍රොෆි.
• 00:37:44 - මාංශ පේශි චන්ද්‍රිකා සෛලවල Myostatin නිෂේධනය (in vitro).
• 00:38:06 - ප්‍රමාද වීඩියෝ පුනරුච්චාරණය: මරණ සහ පිළිකා, DNA හානි, ඔක්සිකාරක ආතතිය සහ දැවිල්ල, බෙන්සීන් බැහැර කිරීම, හෘද වාහිනී රෝග, දෙවන වර්ගයේ දියවැඩියාව, මොළයට බලපෑම් (මානසික අවපීඩනය, ඔටිසම්, භින්නෝන්මාදය, ස්නායු විකෘති වීම), NRF2 මාර්ගය.
• 00:40:27 - බ්‍රොකොලි පැළ හෝ සල්ෆෝරාපේන් මාත්‍රාවක් සොයා ගැනීම පිළිබඳ සිතුවිලි.
• 00:41:01 - නිවසේ පැළවීම පිළිබඳ කථා.
• 00:43:14 - පිසීමේ උෂ්ණත්වය සහ සල්ෆෝරාපේන් ක්රියාකාරිත්වය මත.
• 00:43:45 - ග්ලූකෝරෆනින් වලින් සල්ෆෝරාපේන් බඩවැල් බැක්ටීරියාව පරිවර්තනය කිරීම.
• 00:44:24 - එළවළු වලින් සක්‍රීය මයිරොසිනේස් සමඟ සංයෝජිතව ඇති විට අතිරේක හොඳින් ක්‍රියා කරයි.
• 00:44:56 - පිසීමේ ශිල්පීය ක්රම සහ කුරුස එළවළු.
• 00:46:06 - Goitrogens ලෙස Isothiocyanates.

ස්තූතියි

Sciencedirect.com/science/article/pii/S2213231716302750

Sulforaphane නිෂ්පාදනය කරන්නේ කෙසේද?

උනුසුම් කිරීම Epithiospecifier ප්‍රෝටීන් ක්‍රියාකාරිත්වය අඩු කරන අතර Broccoli වල Sulforaphane සෑදීම වැඩි කරයි

වියුක්ත

බ්‍රොකොලි වල ඇති සල්ෆෝරාපේන්, අයිසොතියෝසයනේට්, ප්‍රබල ආහාර ව්‍යුත්පන්න ප්‍රතිකාසිනොජන් වලින් එකකි. මෙම සංයෝගය නොවෙනස්ව පවතින එළවළු වල නොමැත, ඒ වෙනුවට එය සෑදී ඇත්තේ එහි ග්ලූකෝසිනොලේට් පූර්වගාමියා වන ග්ලූකෝරෆනින් වලින්, බ්‍රොකොලි පටක තලා දැමූ විට හෝ හපන විට තයොග්ලුකොසිඩේස් එන්සයිමයක් වන මයිරොසිනේස් ක්‍රියාවෙනි. කෙසේ වෙතත්, අධ්‍යයන ගණනාවක් පෙන්නුම් කර ඇත්තේ ග්ලූකෝරෆනින් වලින් සල්ෆෝරාපේන් අස්වැන්න අඩු බවත්, කාමර උෂ්ණත්වයේ දී ශාක පටක තලා දැමූ විට ජෛව ක්‍රියාකාරී නොවන නයිට්‍රයිල් ප්‍රතිසමයක් වන සල්ෆෝරාපේන් නයිට්‍රයිල් ප්‍රාථමික ජල විච්ඡේදක නිෂ්පාදනයක් බවත්ය. මෑතකාලීන සාක්ෂි වලට අනුව, Arabidopsis හි ග්ලූකෝසිනොලේට් වලින් නයිට්‍රයිල් සෑදීම පාලනය කරනු ලබන්නේ තාප සංවේදී ප්‍රෝටීනයක් වන epithiospecifier ප්‍රෝටීන් (ESP) මගින් myrosinase හි උත්ප්‍රේරක නොවන සහකාරකයකි. අපගේ අරමුණු වූයේ බ්‍රොකොලි මල් සහ පැළ රත් කිරීමෙන් සල්ෆෝරාපේන් සහ සල්ෆොරපේන් නයිට්‍රයිල් සෑදීමට ඇති බලපෑම පරීක්ෂා කිරීම, බ්‍රොකොලි වල ඊඑස්පී ක්‍රියාකාරකම් තිබේද යන්න තීරණය කිරීම, පසුව ඊඑස්පී ක්‍රියාකාරිත්වයේ තාපය මත යැපෙන වෙනස්කම්, සල්ෆෝරාපේන් අන්තර්ගතය සහ ජෛව ක්‍රියාකාරීත්වය සහසම්බන්ධ කිරීම, ප්‍රේරණය මගින් මනිනු ලැබේ. සෛල සංස්කෘතියේ II අදියර detoxification එන්සයිමය quinone reductase (QR). සමජාතීයකරණයට පෙර නැවුම් බ්‍රොකොලි මල් හෝ බ්‍රොකොලි පැළ සෙල්සියස් අංශක 60 දක්වා රත් කිරීමෙන් එකවර සල්ෆෝරාපේන් සෑදීම වැඩි වන අතර සල්ෆෝරාපේන් නයිට්‍රයිල් සෑදීම අඩු වේ. ඊඑස්පී ක්‍රියාකාරිත්වයේ සැලකිය යුතු අලාභයක් සල්ෆෝරාපේන් නයිට්‍රයිල් සෑදීමේ අඩුවීමට සමාන්තරව සිදුවිය. සෙල්සියස් අංශක 70 සහ ඊට වැඩි උෂ්ණත්වයකට රත් කිරීම බ්‍රොකොලි මල් වල නිෂ්පාදන දෙකම සෑදීම අඩු කරයි, නමුත් බ්‍රොකොලි පැළ වල නොවේ. Cultured mouse hepatoma Hepa lclc7 සෛලවල QR ප්‍රේරණය සමාන්තරව සල්ෆෝරාපේන් සෑදීමේදී වැඩිවේ.

බ්‍රොකොලි මල් සහ පැළ සෙල්සියස් අංශක 60 දක්වා පෙර රත් කිරීමෙන් තලා දැමීමෙන් පසු එළවළු පටක සාරය තුළ සල්ෆෝරාපේන් (SF) myrosinase උත්ප්‍රේරක සෑදීම සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි විය. මෙය සල්ෆෝරාපේන් නයිට්‍රයිල් (SF නයිට්‍රයිල්) සෑදීම සහ එපිතියෝස්පෙසිෆයර් ප්‍රෝටීන් (ESP) ක්‍රියාකාරිත්වය අඩුවීම සමඟ සම්බන්ධ විය.

ප්රධාන වචන: Broccoli, Brassica oleracea, Cruciferae, Cancer, Anticarcinogen, Sulforaphane, Sulforaphane nitrile, Epithiospecifier protein, Quinone reductase

අවසාන වශයෙන්, sulforaphane යනු බ්‍රොකොලි සහ අනෙකුත් කුරුස එළවළු වල දක්නට ලැබෙන ශාක රසායනයකි. අභ්‍යන්තර හා බාහිර සාධක දෙකම නිසා ඇති වන පාලනයකින් තොරව ඔක්සිකාරක ප්‍රමාණයක් මිනිස් සිරුරේ ඔක්සිකාරක ආතතිය ඇති කළ හැකි අතර එය අවසානයේ විවිධ සෞඛ්‍ය ගැටලුවලට තුඩු දිය හැකිය. Sulforaphane හට Nrf2 නිෂ්පාදනය සක්‍රිය කළ හැක, එය ඔක්සිකාරක වලට සෛල ප්‍රතිචාරය පාලනය කරන ආරක්ෂිත ප්‍රතිඔක්සිකාරක යාන්ත්‍රණ නියාමනය කිරීමට උපකාරී වන පිටපත් කිරීමේ සාධකයකි. අපගේ තොරතුරු වල විෂය පථය චිරොක්ට්‍රැක්ටික් සහ කොඳු ඇට පෙළේ සෞඛ්‍ය ගැටළු වලට සීමා වේ. විෂය කරුණු සාකච්ඡා කිරීමට, කරුණාකර වෛද්‍ය ජිමිනෙස්ගෙන් විමසීමට හෝ අපව අමතන්න915-850-0900 .

ආචාර්ය ඇලෙක්ස් ජිම්ීනෙස් විසින් පාලනය කරන ලදී

යොමු කර ඇත්තේ: Sciencedirect.com

අතිරේක මාතෘකා සාකච්ඡාව: උග්ර පිටුපස වේදනාව

ආපහු වේදනාවආබාධිතභාවයට සහ ලොව පුරා වැඩ කරන දින මග හැරීමට වඩාත් පොදු හේතුවකි. වෛද්‍ය කාර්යාල චාරිකා සඳහා දෙවන වඩාත් පොදු හේතුව පිටුපස වේදනාව ආරෝපණය කරයි, ඉහළ ශ්වසන ආසාදනවලින් පමණක් වැඩි වේ. ජනගහනයෙන් ආසන්න වශයෙන් සියයට 80 ක් පමණ ඔවුන්ගේ ජීවිත කාලය පුරාම අවම වශයෙන් එක් වරක්වත් කොන්දේ වේදනාව අත්විඳිනු ඇත. කොඳු ඇට පෙළ යනු අනෙකුත් මෘදු පටක අතර අස්ථි, සන්ධි, බන්ධන සහ මාංශ පේශි වලින් සමන්විත සංකීර්ණ ව්‍යුහයකි. මේ නිසා, තුවාල සහ/හෝ උග්‍ර වූ තත්වයන්, වැනිහර්නිටීස් තැටි, අවසානයේ පිටුපස වේදනාවේ රෝග ලක්ෂණ ඇති විය හැක. ක්රීඩා තුවාල හෝ මෝටර් රථ අනතුරු තුවාල බොහෝ විට පිටුපස වේදනාව සඳහා නිතර නිතර හේතුව වේ, කෙසේ වෙතත්, සමහර විට සරලම චලනයන් වේදනාකාරී ප්රතිඵල ඇති විය හැක. වාසනාවකට මෙන්, චිරොක්ට්‍රැක්ටික් සත්කාර වැනි විකල්ප ප්‍රතිකාර විකල්ප, කොඳු ඇට පෙළ ගැලපීම් සහ අතින් හැසිරවීම් භාවිතයෙන් පිටුපස වේදනාව සමනය කිරීමට උපකාරී වන අතර අවසානයේ වේදනා සහන වැඩි දියුණු කරයි.

අමතර අමතර | වැදගත් මාතෘකාව: නිර්දේශිත El Paso, TX චිරොක්ට්‍රැක්ටර්

***