ආහාර වේල් අතර ඔබට කොපමණ වාරයක් කැළඹීමක්, පහසුවෙන් කලබලයක් සහ නොසන්සුන් බවක් දැනෙන්නේද? ඔබ ඉදිරියට යාමට ඔබ කොපමණ වාරයක් කෝපි මත රඳා සිටිනවාද? කෑමට පෙර ඔබට කොපමණ වාරයක් අවධානය යොමු කිරීමට අපහසු වේද? දැවිල්ල මිනිස් සිරුරේ අත්යවශ්ය ප්රතික්රියාවකි. තුවාල, ආසාදන, සහ/හෝ රෝගාබාධවලින් අපව ආරක්ෂා කිරීම සඳහා ප්රතිශක්තිකරණ පද්ධතිය මගින් එය අවුලුවනු ලැබේ. කෙසේ වෙතත්, මිනිස් සිරුරේ අධික ලෙස දැවිල්ල ඇති වුවහොත් කුමක් සිදුවේද? තවද, මොළයේ අධික දැවිල්ලක් ඇත්නම් කුමක් සිදුවේද?   ස්නායු ප්‍රදාහය වෙනත් ප්‍රසිද්ධ රෝග ලක්ෂණ අතර කාංසාව, ආතතිය, මානසික අවපීඩනය, මොළයේ මීදුම, තෙහෙට්ටුව සහ උදාසීනත්වය වැනි විවිධ සෞඛ්‍ය ගැටලු ඇති කළ හැකිය. වාසනාවකට මෙන්, දැවිල්ල සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කිරීමට සහ මොළයේ ක්‍රියාකාරිත්වය වැඩි දියුණු කිරීමට උපකාරී වන එක් ස්වාභාවික පිළියමක් තිබේ. පර්යේෂණ අධ්‍යයනයන්ට අනුව, curcumin ස්නායු ප්‍රදාහයට එරෙහිව සටන් කිරීමට උපකාරී වේ. පහත ලිපියේ අරමුණ වන්නේ මයික්‍රොග්ලියා, මොළයේ සෞඛ්‍යය සහ සුවතාවය සඳහා curcumin හි ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන බලපෑම් සාකච්ඡා කිරීමයි.  

ක්ෂුද්ර සෛලවල Curcumin හි ප්රති-ගිනි අවුලුවන බලපෑම්

 

වියුක්ත

Lipoteichoic අම්ලය (LTA) ස්නායු ප්‍රදාහ අණු ප්‍රේරණය කරයි, ස්නායු විකෘතිතා රෝග වල ව්‍යාධිජනකයට දායක වේ. එබැවින්, ස්නායු ගිනි අවුලුවන අණු මර්දනය කිරීම චිකිත්සක ක්රමයක් ලෙස වර්ධනය කළ හැකිය. පෙර දත්ත curcumin හි ප්‍රතිශක්තීකරණ-මොඩියුලේටින් බලපෑමක් සඳහා සහාය දක්වන නමුත්, යටින් පවතින සංඥා මාර්ග බොහෝ දුරට හඳුනාගෙන නොමැත. මෙහිදී, අපි LTA-උත්තේජනය කරන ලද BV-2 ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛලවල curcumin හි ප්‍රති-ස්නායු ගිනි අවුලුවන ගුණාංග විමර්ශනය කළෙමු. ගිනි අවුලුවන සයිටොකයින් ගෙඩියක් නෙරෝසිස් සාධකය-? [TNF-?, prostaglandin E2 (PGE2), සහ නයිට්‍රික් ඔක්සයිඩ් (NO] LTA-ප්‍රේරිත ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛල තුළ ස්‍රාවය වීම curcumin මගින් නිෂේධනය කරන ලදී. පසුව, අපගේ යාන්ත්‍රික අධ්‍යයනවලින් හෙළි වූයේ curcumin මගින් ERK, p2, Akt ඇතුළුව මයිටොජන්-සක්‍රීය ප්‍රෝටීන් කයිනේස් (MAPK) LTA-ප්‍රේරිත පොස්පරීකරණය සහ NF-?B මාරු කිරීම වළක්වන බවයි. තවද, curcumin induced hemeoxygenase (HO)-2HO- 38 සහ න්‍යෂ්ටික සාධකය එරිත්‍රොයිඩ් 1-ආශ්‍රිත සාධකය 1 (Nrf-2) ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛලවල ප්‍රකාශනය. HO-2 නිෂේධනය LTA-උත්තේජනය කරන ලද ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛල තුළ මුදා හරින ලද ගිනි අවුලුවන මැදිහත්කරුවන් මත HO-2 හි නිෂේධන බලපෑම ආපසු හැරවිය. curcumin ස්නායු ප්‍රදාහ ප්‍රතිචාර මැඩපැවැත්වීම හරහා ස්නායු විකෘතිතා ආබාධවලට ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා විභව චිකිත්සක කාරකයක් විය හැකි බව. ප්රධාන වචන: curcumin, neuroinflammation, TLR2, HO-1, microglial සෛල  

හැදින්වීම

නිදන්ගත ස්නායු ප්‍රදාහය AD, පාකින්සන් රෝගය (PD), Huntington's disease (HD), ආඝාතය, amyotrophic lateral sclerosis (ALS) සහ බහු ස්ක්ලේරෝසිස් (MS) (Spangenberg සහ Green, ඇතුළු විවිධ ස්නායු විකෘතිතා රෝග සඳහා වැදගත් කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි. 2017). CNS (Nakagawa සහ Chiba, 2015) හි ප්‍රධාන ඵලදායි සෛල සහ නේවාසික ප්‍රතිශක්තිකරණ සෛල වන microglia සක්‍රීය කිරීම මගින් ස්නායු ප්‍රදාහය මැදිහත් වේ. ස්නායු ප්‍රදාහ ප්‍රතිචාර මගින් හෝ බැක්ටීරියා සහ රෝග කාරක වැනි බාහිර සෛලීය විෂ ද්‍රව්‍ය මගින් ඇතිවන නියුරෝන මරණයට හෝ නියුරෝන හානිවලට ප්‍රතිචාර වශයෙන් ක්ෂුද්‍ර සෛල සක්‍රිය කළ හැක (Larochelle et al., 2015). ස්නායු ප්‍රදාහයේදී, සක්‍රිය මයික්‍රොග්ලියා මගින් ගිනි අවුලුවන ප්‍රතිචාර වර්ධනය කිරීම සහ නඩත්තු කිරීම සඳහා විවිධ වර්ගයේ සයිටොකයින්, කෙමොකයින්, ප්‍රතික්‍රියාශීලී ඔක්සිජන් විශේෂ සහ ප්‍රතික්‍රියාශීලී නයිට්‍රජන් විශේෂ නිකුත් කරයි (Moss and Bates, 2001). මෙම ගිනි අවුලුවන මැදිහත්කරුවන් අධික ලෙස නිෂ්පාදනය කිරීම නියුරෝන හානි හා මරණයට හේතු විය හැක. සමුච්චිත සාක්ෂි යෝජනා කරන්නේ ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් ක්‍රියාකාරීත්වය පාලනය කිරීම ස්නායු විකෘති කිරීමේ රෝගයේ බරපතලකම අඩු කළ හැකි බවයි (Perry et al., 2010). එබැවින් ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් ක්‍රියාකාරීත්වය නිෂේධනය කිරීම සඳහා ප්‍රති-ස්නායු-ගිනි අවුලුවන කාරකයන් වර්ධනය කිරීම ස්නායු විකෘතිතා රෝග සඳහා ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා ප්‍රයෝජනවත් විය හැකිය.   පිළිවෙළින් රටා ආශ්‍රිත අණුක රටා (PAMPs) සහ lipopolysaccharide (LPS) සහ lipoteichoic අම්ලය (LTA) වැනි හානි ආශ්‍රිත අණුක රටා (DAMPs) වෙත බැඳිය හැකි මයික්‍රොග්ලියා ප්‍රකාශ රටා හඳුනාගැනීමේ ප්‍රතිග්‍රාහක (PRR) (Jack et al., 2005) ) PRR වල ප්‍රධාන පන්තියක් වන TLR, සහජ ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාර ඇති කිරීම මගින් සත්කාරක ආරක්ෂාව සඳහා තීරණාත්මක කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි. වැඩි වැඩියෙන් අධ්‍යයනයන් පෙන්වා දී ඇත්තේ TLR2 agonist LTA CNS බෝවන රෝග වල ව්‍යාධිජනක ක්‍රියාවලියට සම්බන්ධ වන අතර නියුරෝන හානි ඇති කළ හැකි බවයි (Neher et al., 2011). TLR2 සක්‍රීය කිරීම නිෂේධනය කිරීම ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛල සක්‍රීය කිරීම සහ ඇමයිලොයිඩ් දුර්වල කරයිද? මොළයේ සමුච්චය වීම (McDonald et al., 2016; Hossain et al., 2017). TLR2 හරහා සංඥා සම්ප්‍රේෂණය MyD88 ඇතුළු විවිධ ඇඩැප්ටර ප්‍රෝටීන මගින් මැදිහත් වේ, එය MAPK සහ NF-?B සක්‍රීය කිරීම හරහා පහළට සිග්නල් ප්‍රවර්ධනය කරයි, එය ගිනි අවුලුවන මැදිහත්කරුවන්ගේ ප්‍රකාශනයට මග පාදයි (Larochelle et al., 2015).   ගිනි අවුලුවන සහ ඔක්සිකාරක අණු Keap-Nrf2 (NF-E2 සම්බන්ධ සාධකය 2) හි ඉතා ප්‍රබල සක්‍රියකාරක වේ, එය ඔක්සිකාරක ආතති තත්ත්වයට අනුවර්තනය වීමට II අදියර ඩෙටොක්සිකරණ එන්සයිමවල ප්‍රකාශනය ප්‍රේරණය කරයි (Rojo et al., 2010). සාමාන්‍යයෙන්, Nrf2 ක්‍රියා කරන්නේ අක්‍රිය ස්වරූපයකිනි. උත්තේජනය මත, Nrf2 Keap1 වෙතින් වෙන් වී න්‍යෂ්ටිය තුළට පරිවර්තනය වේ, එහිදී එය ප්‍රතිඔක්සිකාරක ප්‍රතිචාර මූලද්‍රව්‍ය (ARE) සමඟ බැඳී සයිටොප්‍රොටෙක්ෂන් සඳහා ප්‍රතිඔක්සිකාරක ජාන පිටපත් කිරීම සක්‍රීය කරයි (Ma, 2013; Cho et al., 2015). Nrf2-නියාමනය කරන ලද ජානවලින් එකක් වන්නේ එහි ප්‍රවර්ධක කලාපයේ ARE අනුපිළිවෙලක් ඇති හීම් ඔක්සිජන්-1 (HO-1) ය. මෑතකදී, HO-1 ඔක්සිකාරක ආතතිය පාලනය කිරීමේ ප්‍රධාන සාධකයක් ලෙස වාර්තා වී ඇති අතර ස්නායු විකෘතිතා රෝග වල ගිනි අවුලුවන ප්‍රතිචාර (Schipper et al., 2009). HO-1 යනු හීම් අතුරු නිෂ්පාදන බවට පිරිහීමේදී ප්‍රේරණය කළ හැකි අනුපාත සීමා කරන පළමු එන්සයිමය වේ. Heme සහ heme නිෂ්පාදනවල හිතකර සහ විෂ සහිත බලපෑම් අතර සමතුලිතතාවය නිසා HO-1 ස්නායු ආරක්ෂණ හෝ නියුරොටොක්සික් බලපෑමක් ලබා දිය හැකිය (Mancuso et al., 2010). HO-1 හි එක් අතුරු නිෂ්පාදනයක් වන Bilirubin, vivo සහ in vitro හි ඔක්සිකාරක ආතතියෙන් නියුරෝන ආරක්ෂා කිරීමට ප්‍රදර්ශනය කර ඇත. පෙරොක්සයිල් රැඩිකල් ඉවත් කිරීමෙන් බිලිරුබින් බිලිවර්ඩින් බවට ඔක්සිකරණය කළ හැකිය (චෙන්, 2014). HO-1, biliverdin සහ CO වලට ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන ගුණ ඇති බව යෝජනා වී ඇත (Jazwa and Cuadrado, 2010). තවත් අධ්‍යයනයකින් යෝජනා වී ඇත්තේ HO-1 නොමැති මීයන් ගිනි අවුලුවන උත්තේජක වලට ගොදුරු විය හැකි බවත් යකඩ මට්ටම අඩු වීම නිසා නිදන්ගත දැවිල්ල වර්ධනය වූ බවත්ය (Chora et al., 2007). තවද, මෑත අධ්‍යයනයකින් යෝජනා වූයේ Nrf2 සහ HO-1 මාර්ග ඉහළ නියාමනය සක්‍රීය මයික්‍රොග්ලියා හි ගිනි අවුලුවන ප්‍රතික්‍රියාව සැලකිය යුතු ලෙස වළක්වන බවයි (Kim et al., 2016). Nrf2 p38 MAPK සහ NF-?B සංඥා මාර්ගය (Kim BW) යටපත් කිරීමෙන් ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් අධි ක්‍රියාකාරීත්වය වළක්වයි. et al., 2013). iNOS, IL-2 සහ TNF- යන ගිනි අවුලුවන සලකුණු වල වැඩි වීමක් මගින් පෙන්නුම් කරන පරිදි මීයන් තුළ Nrf6 තට්ටු කිරීම ස්නායු ප්‍රදාහයට අධි සංවේදී බව පෙන්නුම් කරන ලදී. (Rojo et al., 2010). එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස, Nrf2 සහ HO-1 ස්නායු විකෘතිතා රෝග සඳහා වැදගත් ප්‍රතිකාර ඉලක්ක ලෙස සැලකේ (Koh et al., 2011; Zhang et al., 2014).   Curcumin, Curcuma longa L වලින් හුදකලා වූ ප්‍රධාන curcuminoid වේ. (කහ) අග්නිදිග ආසියාවේ ඖෂධීය පිළියමක් ලෙස සහ ආහාර ලෙස සියවස් ගණනාවක් තිස්සේ භාවිතා කර ඇත (Kunnumakkara et al., 2017). Curcumin, demethoxycurcumin, bisdemethoxycurcumin, ar-turmerone, ?-turmerone සහ ?-turmerone C හි ඇති ප්‍රධාන ජෛව ක්‍රියාකාරී සංයෝග වේ. දිගු නවීන ඖෂධීය අධ්යයනවලදී, සී. ලෝන්ගා සංඝටක, විශේෂයෙන් curcumin, එහි ප්‍රති-ස්නායු ප්‍රදාහ, ස්නායු ප්‍රොටෙක්ටිව්, රසායනික නිවාරක, ප්‍රතිශක්තිකරණ සහ විභව රසායනික චිකිත්සක බලපෑම් හේතුවෙන් හොඳ ඖෂධීය ක්‍රියාකාරකම් පෙන්නුම් කර ඇත (Garcia-Alloza et al., 2007; Zhou et al., 2017, XNUMX). පෙර අධ්‍යයනයකින් පෙන්නුම් කළේ Curcumin RAW264.7 macrophages හි LPS-ප්‍රේරිත ගිනි අවුලුවන ප්‍රතිචාර වළක්වන බවයි, ප්‍රති-ග්‍රෑම්-ඍණ බැක්ටීරියා ආසාදනවල curcumin වල විභව භූමිකාවක් යෝජනා කරයි (Zhou et al., 2017) සහ vivo සහ in vitro පර්යේෂණ දෙකෙහිම පෙන්වා දී ඇත. curcumin ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන බලපෑම් පෙන්නුම් කරන බව (Garcia-Alloza et al., 2007; Prakobwong et al., 2011; Parada et al., 2015; Li et al., 2016). තවද, curcumin මගින් HO-2 මත යැපෙන ආකාරයෙන් M1 ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් ෆීනෝටයිප් වර්ධනය ප්‍රවර්ධනය කිරීමටත් iNOS ප්‍රේරණය අඩු කිරීමටත්, ඔක්සිකාරක ආතතියට එරෙහිව ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛල ආරක්ෂා කිරීමටත් වාර්තා වී ඇත (Parada et al., 2015). වර්තමාන අධ්‍යයනයේදී, LTA-ප්‍රේරිත ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් ක්‍රියාකාරීත්වයට curcumin බලපෑම් කළ හැකිද යන්න අපි විමර්ශනය කළෙමු. TLR2 ligand LTA යනු ග්රෑම්-ධනාත්මක බැක්ටීරියා වල සෛල බිත්තියේ ප්රධාන සංඝටකයකි.  

ද්රව්ය සහ ක්රම

ද්රව්ය

Curcumin සහ අනෙකුත් ප්‍රතික්‍රියාකාරක Sigma (C7727, >80%, St. Louis, MO, United States) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. Protoporphyrin IX (SnPP) සහ HO-1 (sc-390991) ට එරෙහිව යොමු කරන ලද ප්‍රතිදේහ - Nrf2 (sc-722), TATA-බන්ධන ප්‍රෝටීන් (TBP; sc-74595), ?-tubulin (sc-134237), සහ ?-actin (sc-130065) - Santa Cruz Biotechnology, Inc., (Dallas, TX, United States) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. iNOS (13120) ට එරෙහිව යොමු කරන ලද ප්‍රතිදේහ - ෆොස්ෆොරයිලේටඩ් (p)-MAPK (9910s), MAPK (9926), ප්‍රෝටීන් kinase B (Akt; 4685), p-Akt (13038), සහ NF-?B මාර්ග කට්ටලයක් (9936) - Cell Signaling Technology, Inc., (Danvers, MA, United States) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. LTA InvivoGen (tlrl-pslta,Toulouse, France) වෙතින් ලබා ගන්නා ලදී. අතිරේකව, JNK inhibitor (JNK inhibitor II; 420119), Akt inhibitor (wortmannin; 12-338), ERK inhibitor (PD98059, 513000), සහ p38 inhibitor (SB230580, 559395MD) එක්සත් ජනපදයෙන් මිලදී ගන්නා ලදී. ) සෛල සංස්කෘතික මාධ්‍යය, DMEM, සහ fetal bovine serum (FBS) Gibco BRL (දැන් Invitrogen Corporation, Carlsbad, CA, United States) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී.  

සෛල සංස්කෘතිය

Mouse BV-2 microglial සෛල ATCC වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. 10% CO0.1 සහ 37% වාතය තෙතමනය සහිත වායුගෝලය තුළ 5°C උෂ්ණත්වයකදී 2% තාප අක්‍රිය FBS සහ 95% penicillin-streptomycin (BioSource International, Camarillo, CA, United States) සමඟ අතිරේක DMEM හි සෛල වගා කරන ලදී.  

සෛල ශක්‍යතා විශ්ලේෂණය

Curcumin වල සයිටොටොක්සිසිටි බව ක්ෂුද්‍ර සංස්කෘතිය [3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide] (MTT) පදනම් වූ වර්ණමිතික විශ්ලේෂණයක් භාවිතයෙන් තක්සේරු කරන ලදී. ළිං තහඩු 24 ක සෛල ළිඳකට සෛල 5 සිට 105 දක්වා ඝනත්වයකින් යුක්ත විය. MTT ද්රාවණය (5 mg / ml 5 ml) එක් එක් ළිඳට එකතු කරන ලදී (අවසාන සාන්ද්රණය 62.5 mg / ml). 3% CO37 හි 5 ° C දී පැය 2 ක් පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කිරීමෙන් පසු, අධි ප්‍රවාහය ඉවත් කරන ලද අතර ශක්‍ය සෛලවල නිපදවන ෆෝමසාන් ස්ඵටික dimethylsulfoxide (DMSO) මිලි ලීටර් 150 කින් ද්‍රාව්‍ය කරන ලදී. එක් එක් ළිඳෙහි අවශෝෂණය පසුව මයික්‍රොප්ලේට් රීඩරයක් භාවිතයෙන් 570 nm දී කියවන ලදී (Wallac 1420; PerkinElmer, Inc., Boston, MA, United States).  

නයිට්රයිට් සාන්ද්රණය මැනීම

සෛල සංස්කෘතීන්හි සංශ්ලේෂණය NO සංශ්ලේෂණය මනිනු ලැබුවේ මයික්‍රොප්ලේට් සමඟ ග්‍රීස් ක්‍රමය මගිනි. නයිට්‍රයිට් මැනීම සඳහා, 100-?l ඇල්කොට්ස් කොන්දේසි සහිත මාධ්‍යයෙන් ඉවත් කර කාමර උෂ්ණත්වයේ දී Griess ප්‍රතික්‍රියාකාරක [1% sulfanilamide/0.1%N-(1-naphthyl)-ethylenediaminedihydrochloride/2.5% H3PO4] සමාන පරිමාවකින් පුර්වීකරණය කරන ලදී. විනාඩි 10 නයිට්‍රයිට් සාන්ද්‍රණය නිර්ණය කරන ලද්දේ Vmax 540-ළිං ක්ෂුද්‍ර ප්ලේට් වර්ණාවලීක්ෂ ඡායා රූපමාපකය (අණුක උපාංග, මෙන්ලෝ පාර්ක්, CA, එක්සත් ජනපදය) සමඟින් 96 nm හි අවශෝෂණය මැනීමෙනි. සෝඩියම් නයිට්රයිට් සම්මතයක් ලෙස භාවිතා කරන ලදී.  

TNF මැනීම-? සහ PGE2 සාන්ද්‍රණය

සෛල ප්‍රථමයෙන් පැය 1ක් සඳහා curcumin විවිධ සාන්ද්‍රණයෙන් සහ පසුව LTA සමඟ පැය 16ක් සඳහා පුර්වගත කරන ලදී. පැය 24 ක ඉන්කියුබේෂන් පසුව, TNF-? සහ PGE2 මට්ටම් නිෂ්පාදකයාගේ උපදෙස් අනුව එන්සයිම සම්බන්ධිත ප්‍රතිශක්තිකරණ විශ්ලේෂණය (ELISA) කට්ටලයක් (R&D Systems, Minneapolis, MN, United States) භාවිතයෙන් සංස්කෘතික මාධ්‍ය තුළ ප්‍රමාණනය කරන ලදී.  

න්යෂ්ටික නිස්සාරණය සකස් කිරීම

BV-2 ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛල සීතල PBS සමඟ තුන් වරක් සෝදා 3000 ?l PBS හි විනාඩි 800 (5 ° C) සඳහා 4 ºg දී කේන්ද්‍රාපසාරී භාවිතා කර එකතු කරන ලදී. සෛල පෙති බෆරය A [10 mM HEPES-KOH (pH 7.9) හි අත්හිටුවන ලදී; 1.5 mM MgCl2; 10 mM KCl; 0.5 mM dithiothreitol (DTT); 0.2 mM protease inhibitor (PI)] සහ අයිස් මත විනාඩි 5ක් පුර්වකාශනය කර ඇත. බෆර් B [10 mM HEPES-KOH (pH 7.9); 1.5 mM MgCl2; 420 mM NaCl; 0.2 mM EDTA; ග්ලිසරෝල් 25% v/v; 0.1 mM DTT; 0.2 mM PI] සෛල නිස්සාරණයට එකතු කරන ලද අතර 5 °C දී විනාඩි 11,000 ට 1 °g දී කේන්ද්‍රාපසාරණයට පෙර විනාඩි 4 ක් අයිස් මත තැන්පත් කරන ලදී. සම්පූර්ණ ලිසිස් බෆරය B [10 mM HEPES-KOH (pH 7.9) එකතු කිරීමත් සමඟ න්‍යෂ්ටික ප්‍රෝටීන නිස්සාරණය කරන ලදී. 1.5 mM MgCl2; 10 mM KCl; 0.5 mM DTT; 0.2 mM PI; 25% (w/v) ග්ලිසරින්; 420 mM NaCl; 0.2 mM EDTA] විනාඩි 30ක් 4°C දී ඉඳහිට සුලිය සමඟ. 11,000°C දී මිනිත්තු 5ක් සඳහා 4°g දී කේන්ද්‍රාපසාරී කිරීමෙන් පසුව, අධිනිශ්චය ද්‍රව්‍ය එකතු කර -70°C දී ගබඩා කර ඇත.  

බටහිර බ්ලොට් විශ්ලේෂණය

BV-2 සෛල අයිස්-සීතල ලයිසිස් බෆරයක අස්වනු නෙළන ලදී (1% ට්‍රයිටන් X-100; 1% ඩිඔක්සිකොලේට්; 0.1% සෝඩියම් ඩොඩෙසිල් සල්ෆේට්). සෛල ලයිසේට් වල ප්‍රෝටීන් අන්තර්ගතය පසුව Bradford reagent (Bio-Rad Protein Assay Kit I5000001; Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA, United States) භාවිතයෙන් තීරණය කරන ලදී. එක් එක් නියැදියක ඇති සම්පූර්ණ ප්‍රෝටීන් (50 ?g) 7.5% SDS-PAGE මගින් වෙන් කර පොලිවිනිලයිඩීන් ඩයිෆ්ලෝරයිඩ් පටල වෙත මාරු කරන ලදී. මිනිත්තු 5 ක් සඳහා කාමර උෂ්ණත්වයේ දී 30% මේද නොවන කිරි සහිත විශේෂිත නොවන බන්ධන ස්ථාන අවහිර කිරීමෙන් පසුව, iNOS (1:500), p-Akt (1:1,000), p- වලට එරෙහිව යොමු කරන ලද ප්‍රාථමික ප්‍රතිදේහ සමඟ පටල පුර්වගත කරන ලදී. MAPK (1:1,000), MAPK (1:1,000), p-p65, p65 (1:500), pI?B?, I?B? (1:1,000), HO-1 (1:1,000), Nrf2 (1:1,000), TBP (1:3,000), ? (1:1,000), HO-1 (1:1.0), සහ ඇක්ටින් (1:3,000) පැය 16 සඳහා 4°C. 2768 සඳහා කාමර උෂ්ණත්වයේ දී අශ්ව රේඩිෂ් පෙරොක්සිඩේස්-සංයුජ ප්‍රති-හාවා (sc-1; 5,000:2371) හෝ ප්‍රති-මූසික (sc-1; 5,000:1) ද්විතියික ප්‍රතිදේහ (Santa Cruz Biotechnology, Inc.) සමඟ ඉන්කියුබේෂන් කිරීමෙන් පසුව සිදු විය. h. එක් එක් මංතීරුව සඳහා පැටවීමේ පාලනය ලෙස Tubulin භාවිතා කරන ලදී. වැඩි දියුණු කරන ලද රසායන ද්‍රව්‍ය හඳුනාගැනීමේ කට්ටලයක් (GE Healthcare, Chicago, IL, United States) භාවිතයෙන් ප්‍රෝටීන දෘෂ්‍යමාන කරන ලදී. Tween-20 සමඟ PBS සමඟ සේදීමෙන් පසුව, එක් එක් මංතීරුව සඳහා පැටවීමේ පාලනය ලෙස Gel Docsed භාවිතයෙන් ප්‍රෝටීන් පටි දර්ශනය විය. Quant 350 විශ්ලේෂකය (GE Healthcare) භාවිතයෙන් ප්‍රෝටීන දෘෂ්‍යමාන කරන ලදී.  

තත්‍ය කාලීන RT-PCR

නිෂ්පාදකයාගේ උපදෙස් අනුව RNA ස්පින් miniRNA හුදකලා කට්ටලයක් (GE Healthcare, Uppsala, Sweden) භාවිතයෙන් සෛල වලින් සම්පූර්ණ RNA හුදකලා කරන ලදී. maxime RT PreMix (Takara, Gyeonggi-do, Japan) සහ නැංගුරම් ලා ඇති oligo-dT1-primers භාවිතයෙන් cDNA මුළු RNA වලින් 15 g සිට සංස්ලේෂණය කරන ලදී. Chromo4TM උපකරණයක් (Bio-Rad) සහ SYBR Green Master Mix (Applied Biosystems, Foster City, CA, United States) භාවිතයෙන් තත්‍ය කාලීන PCR සිදු කරන ලදී. ඉලක්ක mRNA වල සාපේක්ෂ ප්‍රමාණයන් ?-actin (Ct) සඳහා ඉලක්ක mRNA Ct අගයන් සාමාන්‍යකරණය කිරීම මගින් සංසන්දනාත්මක සීමාව (Ct) ක්‍රමය භාවිතයෙන් තීරණය කරන ලදී. අධ්‍යයනයේ භාවිතා කරන ලද ප්‍රයිම් අනුපිළිවෙලවල් වගුව ?1 හි පෙන්වා ඇත.  

සංඛ්යාන විශ්ලේෂණය

දත්ත මධ්යන්ය (සම්මත අපගමනය, SD) ලෙස ප්රකාශිත වේ. සෑම අත්හදා බැලීමක්ම අවම වශයෙන් තුන් වතාවක් නැවත නැවතත් සිදු කෙරේ. සැලකිය යුතු වෙනස්කම් නිර්ණය කිරීම සඳහා GraphPad Prism මෘදුකාංගය (අනුවාදය 16.0) සඳහා සංඛ්‍යානමය පැකේජය භාවිතයෙන් සංඛ්‍යානමය විශ්ලේෂණය සිදු කරන ලදී. අපි ශිෂ්‍යයාගේ t-පරීක්‍ෂණය හෝ විචල්‍යයේ ඒක-මාර්ග විශ්ලේෂණය (ANOVA) සහ පසුව Dunn ගේ පශ්චාත් hoc පරීක්ෂණ විශ්ලේෂණය සඳහා භාවිතා කළෙමු. P-අගය <0.05 සංඛ්‍යානමය වශයෙන් වැදගත් ලෙස සැලකේ.  

ප්රතිපල

Curcumin සෛල ශක්‍යතාවට බලපෑවේ නැත

මෙම අධ්‍යයනයේ දී භාවිතා කරන ලද curcumin සාන්ද්‍රණය BV2 microglia වල ශක්‍යතාවයට බලපෑවේ ද යන්න තීරණය කිරීම සඳහා සෛල ශක්‍යතා පර්යේෂණ සිදු කරන ලදී. රූප සටහන ?1 පෙන්නුම් කරන්නේ 5-20 ?M සාන්ද්‍රණ පරාසයේ ඇති curcumin, 5 ?g/ml LTA සමඟ හෝ රහිතව, BV2 microglia හි සයිටොටොක්සිසිටි නිෂ්පාදනය නොකළ බවයි. එමනිසා, අපි වැඩිදුර අධ්‍යයනය සඳහා මෙම curcumin සාන්ද්‍රණය භාවිතා කළෙමු.  

Curcumin LTA-සක්‍රීය BV2 මයික්‍රොග්ලියා හි ස්නායු ප්‍රදාහ අණු නිෂ්පාදනය වැලැක්වීය.

ගිනි අවුලුවන සයිටොකයින් වල ස්‍රාවය කෙරෙහි curcumin වල බලපෑම විමර්ශනය කිරීම සඳහා, BV2 සෛල පැය 24 ක් සඳහා curcumin තිබීම සහ නොමැතිකම LTA සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලදී. LTA එකතු කිරීමට පෙර Curcumin ඉවත් කර නැත. NO, PGE2, සහ TNF- නිදහස් කිරීම? curcumin මගින් සැලකිය යුතු සහ මාත්‍රාව මත යැපෙන ලෙස අඩු කරන ලදී (Figures 2A'C). තවද, LTA iNOS සහ COX-2 හි mRNA ප්‍රකාශනය වැඩි කළේය. සාන්ද්‍රණය මත යැපෙන ආකාරයෙන් LTA මගින් උත්තේජනය කරන ලද BV2 ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛලවල COX-2 සහ iNOS වල mRNA ප්‍රකාශනය curcumin සමඟ ඉන්කියුබේෂන් යටපත් විය (Figures 2D, E).  

BV-2 ක්ෂුද්‍ර සෛලවල NF-?B හි කර්කියුමින් යටපත් කරන ලද LTA-ප්‍රේරිත සක්‍රීය කිරීම

ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් ක්‍රියාකාරීත්වයට ප්‍රතිචාර වශයෙන් ගිනි අවුලුවන ප්‍රෝටීන ප්‍රකාශනය කේතනය කරන ජාන NF-?B හි පිටපත් කිරීමේ පාලනය යටතේ පැවතුනි. එබැවින්, LTA-උත්තේජනය කරන ලද ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛලවල NF-?B සක්‍රිය කිරීම සඳහා curcumin වල බලපෑම අපි පරීක්ෂා කළෙමු. I?B? හි පොස්පරීකරණයේ ලාක්ෂණික වැඩි වීමක් LTA විසින් ඇති කරන ලද බව ප්රතිඵල පෙන්නුම් කළේය. කර්කුමින් සමඟ පූර්ව ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පසුව, pI?B මට්ටම්? සාන්ද්‍රණය මත යැපෙන ආකාරයෙන් සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කරන ලදී (රූපය ?3 සහ පරිපූරක රූපය S1). අඛණ්ඩව, LTA විසින් ප්‍රේරණය කරන ලද NF-?B p65 අනු ඒකකයේ න්‍යෂ්ටික සංක්‍රාන්තිය curcumin සමඟ පූර්ව ප්‍රතිකාර කිරීම මගින් ද දුර්වල විය. එකට ගත් විට, curcumin NF-?B හි න්‍යෂ්ටික ස්ථාන මාරුව සහ සක්‍රීය කිරීම යටපත් කිරීම මගින් ස්නායු ප්‍රදාහ අණු වල ප්‍රකාශනය දුර්වල කරයි. ආධාරක දත්ත ලෙස සංඛ්‍යානමය විශ්ලේෂණය සමඟ ප්‍රමාණකරණය සපයන ලදී.  

Curcumin නිෂේධනය කරන ලද LTA-ප්‍රේරිත p38 සක්‍රීය කිරීම, සහ BV-2 ක්ෂුද්‍ර සෛල තුළ ERK MAPK

NF-?B හැරුණු විට, MAPKs යනු ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛල තුළ ඇති ස්නායු ප්‍රදාහ අණුවල උඩු ගංඟා මොඩියුලේටර් ද වේ. පෙර අධ්‍යයනවලින් පෙන්නුම් කළේ කර්කියුමින් මයික්‍රොෆේජ් හි LPS-ප්‍රේරිත MAPKs පොස්පරීකරණයට විරුද්ධ වන බවයි (Yang et al., 2008; Kunnumakkara et al., 2017). MAPK නියාමනය කිරීම හරහා curcumin ස්නායු ප්‍රදාහය වළක්වන්නේ දැයි විමර්ශනය කිරීමට, LTA-ප්‍රේරිත MAPK ෆොස්ෆොරයිලේෂන් මත එහි බලපෑම අපි විමසා බැලුවෙමු. BV-2 microglial සෛල පැය 3 ක් සඳහා curcumin විවිධ සාන්ද්‍රණයන් සමඟ පූර්ව-ප්‍රතිකාර කරන ලද අතර පසුව 1 h සඳහා LTA සමඟ උත්තේජනය කරන ලදී. රූපය ?4A සහ S2 පරිපූරක රූපයේ පෙන්වා ඇති පරිදි, curcumin මගින් LTA-ප්‍රේරිත ERK, p38, සහ Akt ෆොස්ෆොරයිලේෂන් නිෂේධනය කරන ලදී. කෙසේ වෙතත්, 20 ?M දක්වා curcumin LTA-ප්‍රේරිත JNK පොස්පරීකරණයට බල නොපායි. MAPKs මාර්ගය සයිටොකයින්, කෙමොකයින් සහ අනෙකුත් ස්නායු ප්‍රදාහ අණු නිපදවීමට මැදිහත් වන බවට වාර්තා වී ඇත. එබැවින්, අපි මීළඟට ERK, p38, JNK, සහ Akt inhibitors භාවිතා කරමින් BV2 සෛලවල ස්නායු ප්‍රදාහ අණු නිෂ්පාදනයේ දී ERK, p38, JNK සහ Akt හි කාර්යභාරය විමර්ශනය කළෙමු. කෙසේ වෙතත්, p38 inhibitor SB203580 පමණක් LTA-ප්‍රේරිත iNOS හි NO සහ mRNA ප්‍රකාශන මට්ටම් මුදා හැරීම සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කළේය (Figures 4B, C). JNK හි පොස්පරීකරණය curcumin මගින් වළක්වා නොතිබුණද, JNK inhibitor II LTA-ප්‍රේරිත NO නිකුතුව සැලකිය යුතු ලෙස වළක්වයි (Figure ?4B). ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී යන්නේ LTA-උත්තේජනය කරන ලද ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් හි curcumin හි ප්‍රති-ස්නායු ගිනි අවුලුවන බලපෑම්වලට MAPKs සංඥා මාර්ග සම්බන්ධ වන බවයි. සංඛ්‍යානමය විශ්ලේෂණය සමඟ ප්‍රමාණ කිරීම ආධාරක දත්ත ලෙස සපයා ඇත.  

HO-1 සංඥාව නිෂේධනය කිරීම අහෝසි කරන ලද Curcumin's නිෂේධනීය බලපෑම ස්නායු ප්‍රදාහ ප්‍රතිචාර මත

HO-1 මයික්‍රොග්ලියා හි ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන සහ ප්‍රතිඔක්සිකාරක මොඩියුලේටරයක් ​​ලෙස ක්‍රියා කරයි (Schipper et al., 2009). වෙස්ටර්න් බ්ලොට් සහ ආර්ටී-පීසීආර් විශ්ලේෂණයන් පෙන්නුම් කළේ කර්කියුමින් විසින් ප්‍රෝටීන් සහ එම්ආර්එන්ඒ මට්ටම්වලදී HO-1 ප්‍රකාශනය ඉහළ නංවා ඇති බවයි, රූප 5A°D සහ S3 පරිපූරක රූපයේ පෙන්වා ඇත. HO-1 mRNA සහ ප්‍රෝටීන වල ප්‍රකාශනය BV-2 මයික්‍රොග්ලියල් සෛල තුළ පිළිවෙළින් 20 h සහ 4 h සඳහා 8?M curcumin සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලදී. තවද, curcumin පැය 2ක් ඇතුළත Nrf1 න්‍යෂ්ටික ස්ථාන මාරුව වැඩි කළ අතර එහි න්‍යෂ්ටික පරිවර්තන තත්ත්වය පැය 2 දක්වා දීර්ඝ කළේය (රූප සටහන 5E, F සහ අතිරේක රූපසටහන S3). මීළඟට, LTA-උත්තේජනය කරන ලද BV-1 ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛල තුළ curcumin-induced HO-2 ප්‍රති-ස්නායු ගිනි අවුලුවන ප්‍රතිචාරයක් මැදිහත් වී ඇත්ද යන්න අපි විමර්ශනය කළෙමු. අපි HO-1 inhibitor SnPP සමඟ සෛලවලට ප්‍රතිකාර කළෙමු. අපි පසුව LTA-ප්‍රේරිත NO සහ TNF- මත curcumin වල බලපෑම ඇගයීමට ලක් කළෙමු. නිදහස් කිරීම. SnPP සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීම NO සහ TNF-a නිකුතුවේ curcumin-මැදිහත්කාර නිෂේධනය සැලකිය යුතු ලෙස යටපත් කර ඇත (Figures 5G, H). එකට ගත් විට, මෙම ප්‍රතිඵලවලින් හෙළි වන්නේ curcumin මත යැපෙන HO-1 සහ Nrf-2 සංඥා සක්‍රීය කිරීම ස්නායු ප්‍රදාහ ප්‍රතිචාර අඩු කිරීමේදී තීරණාත්මක කාර්යභාරයක් ඉටු කරන බවයි. සංඛ්‍යානමය විශ්ලේෂණය සමඟ ප්‍රමාණ කිරීම ආධාරක දත්ත ලෙස සපයා ඇත.  

සාකච්ඡා

CNS හි ප්‍රධාන නේවාසික මැක්‍රෝෆේජ් වන මයික්‍රොග්ලියා, ස්නායු ප්‍රදාහය සහ වරණීය නියුරෝන මරණයට මැදිහත් වීමේ ප්‍රධාන ඵලදායි සෛල බව වාර්තා වී ඇත (Perry et al., 2010). ක්ෂුද්‍ර සෛල මගින් LPS සහ LTA වැනි සක්‍රියකාරක වලට නිරාවරණය වීමෙන් පසු ස්නායු ප්‍රදාහ අණු නිෂ්පාදනය වැඩි කරයි, පිළිවෙලින් TLR4 සහ TLR2 (Perry and Holmes, 2014; Hossain et al., 2017). TLR2 හි ප්‍රකාශනය සහ සක්‍රීය කිරීම PD සහ ඩිමෙන්ශියාව වැනි ස්නායු විකෘතිතා රෝග වල ප්‍රගතිය සමඟ සම්බන්ධ වේ (Dzamko et al., 2017). උදාහරණයක් ලෙස, TLR2 සක්‍රීය කිරීම මගින් PD මොළයේ ?-synuclein නියාමනය කළ හැකි අතර PD මොළයේ ව්‍යාධිජනකය සඳහා වැදගත් කාර්යභාරයක් ඉටු කළ හැකිය (Roodveldt et al., 2013). මීට අමතරව, කිම් සී. et al. (2013) ද පෙන්නුම් කළේ මීයන් PD මාදිලිවල TLR2 knockout හෝ knockdown මගින් ස්නායු පරිහානිය දුර්වල වී ඇති බවයි. මේ අනුව, TLR2-මැදිහත් වූ ක්ෂුද්‍ර ග්ලියා සක්‍රීය කිරීම සහ නියුරොටොක්සිසිටි පාලනය කිරීම ස්නායු විකෘතිතා රෝග සඳහා ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා වැදගත් චිකිත්සක ප්‍රවේශයක් ලෙස යෝජනා කර ඇත. මෙම ක්‍රියාවලියේ විභව කාරකයක් curcumin විය හැකිය, එය විවිධ අත්හදා බැලීම් ආකෘතිවල ස්නායු-ආරක්ෂිත සහ ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන බලපෑම් ඇති කරන බව පෙන්වා දී ඇත (Parada et al., 2015; Li et al., 2016). Curcumin යනු අධික ලිපොෆිලික් ස්වභාවික සංයෝගයකි. Curcumin වලට රුධිර මොළයේ බාධකය තරණය කිරීමට හැකි බවත් එය ප්‍රධාන වශයෙන් මොළයේ හිපොකැම්පස් හි සංකේන්ද්‍රණය වී ඇති බවත් පෙර අධ්‍යයනයකින් මනාව පෙන්නුම් කර ඇත (Tsai et al., 2011). සමහර අධ්‍යයනයන් වාර්තා කළේ curcumin මගින් HIV-1 gp120-induced neuronal හානි වැලැක්වීම සහ LPS-induced microglia හි ප්‍රති-ස්නායු ගිනි අවුලුවන බලපෑම් ලබා දුන් බවයි (Gong et al., 2012). curcumin හි මෙම ආරක්ෂිත බලපෑම එහි ප්රති-ගිනි අවුලුවන ක්රියාවන් මත රඳා පවතින බව පෙනේ. Curcumin හට මයික්‍රොග්ලියා ක්ෂය වූ තත්ත්‍වයන් යටතේ අකාර්යක්ෂම වන අතරම මයික්‍රොග්ලියා-මැදිහත් වූ නියුරොටොක්සිසිටි වලට එරෙහිව නියුරෝන ආරක්ෂා කළ හැක (Park et al., 2001; Yang et al., 2008; Parada et al., 2015). පර්යන්ත සෛලවල සමාන අධ්‍යයනයන් ද curcumin හි ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන බලපෑම් පෙන්නුම් කළේය. RAW 264.7 murine macrophages භාවිතා කරමින්, අධ්‍යයනයන් පෙන්වා දී ඇත්තේ curcumin PGE2, NO, සහ TNF- නිෂේධනය කරන බවයි. LPS උත්තේජනයෙන් පසුව නිකුත් කිරීම (Pae et al., 2008). කෙසේ වෙතත්, ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛලවල TLR2-ප්‍රේරිත ස්නායු ප්‍රදාහය මත curcumin වල බලපෑම සම්පූර්ණයෙන් වටහාගෙන නොමැත.   සක්‍රීය මයික්‍රොග්ලියාවේ සංඥා මාර්ග නියාමනය CNS homeostasis පවත්වා ගැනීමේදී වැදගත් වන්නේ නියාමනය නොකළ ස්නායු ප්‍රදාහ ප්‍රතිචාර නිසා සයිටොකයින්, කෙමොකයින්, NO, සහ ROS වැනි ගිනි අවුලුවන අණු මුදා හැරීම හරහා යාබද නියුරෝන මිය යා හැකි බැවිනි (Perry and Holmes, 2014; Spangenberg සහ Green, 2017). උදාහරණයක් ලෙස, එන්ඩොටොක්සින් යටතේ අධික NO සංශ්ලේෂණය ප්‍රතික්‍රියාශීලී නයිට්‍රජන් විශේෂ සහ නියුරෝන සෛල මරණයට හේතු වේ (Perry et al., 2010). මයික්‍රොග්ලියා (Xia et al., 2) හි MAPK/ERK මාර්ගය සක්‍රීය කිරීම හරහා නියුරෝන මරණයට PGE2015 දායක වන බව ද පෙන්වා දී ඇත. මෙම වර්තමාන අධ්‍යයනයේදී, curcumin මගින් TNF-?, NO, සහ PGE2 යන ගිනි අවුලුවන මැදිහත්කරුවන්ගේ ස්‍රාවය වීම වළක්වන බවත්, LTA සමඟ උත්තේජනය කරන ලද BV2 මයික්‍රොග්ලියා හි iNOS සහ COX-2 ප්‍රකාශනය කරන බවත් අපි පෙන්වා දුන්නෙමු. Curcumin මගින් සෛල පැවැත්ම වෙනස් නොකර LTA හි මෙම බලපෑම් අඩු කරන බව අපි තවදුරටත් පෙන්වා දුන්නෙමු, curcumin ආරක්ෂිත වන අතර ස්නායු ප්‍රදාහයේ විභව චිකිත්සක කාරකයක් ලෙස සැලකිය හැකිය.   රෙඩොක්ස් හෝමියස්ටැසිස් නියාමනය කිරීමේදී තීරණාත්මක කාර්යභාරයක් ඉටු කරන ප්‍රධාන පිටපත් කිරීමේ සාධකය NF-?B වේ. NF-?B නියුරෝන තුවාල සඳහා ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් ගිනි අවුලුවන ප්‍රතිචාරවල ප්‍රධාන නියාමකයා ලෙස සැලකේ (Acharyya et al., 2007). මෑත අධ්යයනයන් පෙන්වා දුන්නේ NF-?B සක්රිය කිරීම මගින් NO, PGE2, සහ TNF-?, සහ IL-1b නිෂ්පාදනය වැනි ගිනි අවුලුවන අණු වල ප්රකාශනය පාලනය කරන බවයි (Acharyya et al., 2007). එබැවින්, NF-?B සක්‍රිය කිරීමේ මොඩියුලේෂන් ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් ක්‍රියාකාරීත්වය පාලනය කිරීම සඳහා තීරණාත්මක ක්‍රමයක් ලෙස සැලකේ. NF-?B සංඥා මාර්ගය සක්රිය කිරීම I?B ප්රෝටීන් මගින් මැදිහත් වේ. අයි මෙම අධ්‍යයනයේ දී, Curcumin මගින් ෆොස්ෆොරයිලේෂන් ද්විත්ව නිෂේධනය සහ I?B? හායනය මෙන්ම p65 හි න්‍යෂ්ටික පරිවර්තන නිෂ්පාදනය කරන ලද බව පෙන්නුම් කරන ලදී. -2 ක්ෂුද්ර සෛල.   ක්ෂීරපායී සෛල තුළ, ERK, JNK, සහ p38 ඇතුළු MAPK සංඥා මාර්ග, විවිධාකාර ස්නායු ප්‍රදාහක මැදිහත්කරුවන් නිෂ්පාදනය කිරීමට දායක වේ (Chantong et al., 2014). මෙම වර්තමාන අධ්‍යයනයේ දී, curcumin සමඟ පූර්ව ප්‍රතිකාර කිරීම p38 සහ ERK හි පොස්පරීකරණය අඩු විය. තවද, p38 inhibitor SB203580 NO හි ස්‍රාවය සහ ප්‍රධාන ගිනි අවුලුවන ජානය වන iNOS හි mRNA ප්‍රකාශනය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කළේය. මෙම ප්‍රතිඵල යෝජනා කළේ කර්කියුමින් විසින් LTA-උත්තේජනය කරන ලද BV-2 ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛලවල ප්‍රති-ස්නායු ගිනි අවුලුවන බලපෑම් ආරම්භ කළ බව, අර්ධ වශයෙන් p38 MAPK සක්‍රීය කිරීම නිෂේධනය කිරීම හරහාය. PI3K/Akt මත යැපෙන සංඥා මාර්ගය මයික්‍රොග්ලියා හි ගිනි අවුලුවන ප්‍රතිචාර ප්‍රවර්ධනය කරයි. මයික්‍රොග්ලියාවේ NF-?B සක්‍රීය කිරීම හරහා මයික්‍රොග්ලියාවේ ගිනි අවුලුවන මැදිහත්කරුවන්ගේ ප්‍රකාශනය තුළ Akt මාර්ගයෙහි මැදිහත්වීම පෙන්නුම් කර ඇත (Lo et al., 2015). Curcumin PI3K හි පහළ ඉලක්කය වන පොස්පරීකරණය කරන ලද Akt මර්දනය කළේය. කෙසේ වෙතත්, PI3K inhibitor wortmannin NO ස්‍රාවය කිරීම හෝ iNOS හි mRNA ප්‍රකාශනය කෙරෙහි කිසිදු බාධාකාරී බලපෑමක් නොපෙන්වයි. එකට ගත් විට, මෙම දත්ත යෝජනා කරන්නේ curcumin හි ප්‍රති-ස්නායු ගිනි අවුලුවන බලපෑම ප්‍රධාන වශයෙන් NF-?B සහ MAPKs සංඥා නිෂේධනය කිරීම හරහා සිදු වන බවයි.   මයික්‍රොග්ලියල් සෛලවල ගිනි අවුලුවන-අණු ප්‍රකාශනය සෘණාත්මකව නියාමනය කරන අන්තර් සෛලීය මාර්ගය ද අපි හඳුනා ගත්තෙමු. Nrf2 යනු මොළයේ ආසාදන සඳහා ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් ගිනි අවුලුවන ප්‍රතිචාර නියාමනය කරන රෙඩොක්ස්-සංවේදී පිටපත් කිරීමේ සාධකයකි. Nrf2 හි බලපෑම විවිධ vivo මාදිලිවල විස්තර කර ඇති අතර එහිදී මීයන් තුළ Nrf2 තට්ටු කිරීම ඇදුම හෝ එම්පිසීමාවට ඇති අවදානම වැඩි දියුණු කරයි (Ma, 2013). තවද, TLR2/TLR4 agonist WT මීයන්ට සාපේක්ෂව Nrf2 KO මීයන් තුළ ගිනි අවුලුවන ප්‍රතිචාර ප්‍රවර්ධනය කළේය (Kong et al., 2011). වත්මන් අධ්‍යයනයේ දී, අපි පෙන්වා දුන්නේ curcumin Nrf2 සහ එහි පහළ ප්‍රෝටීන් HO-1 හි ප්‍රකාශනය වැඩි කළ බවයි. HO-1 යනු ගිනි අවුලුවන සහ ඔක්සිකාරක ප්‍රතිචාර නියාමනය කිරීමේදී සම්බන්ධ වන ප්‍රධාන සංඥා අණුවකි. HO-1 ජානය එහි ප්‍රවර්ධක කලාපයේ ARE අනුපිළිවෙලක් ඇත, එය පිටපත් කිරීමේ සාධකය Nrf2 සඳහා බන්ධන අඩවියකි. අධ්‍යයනයන් කිහිපයක් යෝජනා කර ඇත්තේ NF-?B Nrf-2-ARE සංඥා මාර්ගයට බාධා කරන නිසා HO-1 සහ Nrf2 සංඥා ප්‍රේරණය කළ බොහෝ සංයෝග අහඹු ලෙස NF-?B සක්‍රිය කිරීම මර්දනය කළ බැවිනි (Li et al., 2016). HO-1 ප්‍රකාශනය මයික්‍රොග්ලියල් විශේෂිත සයිටොප්‍රොටෙක්ටිව් ආචරණය සඳහා අත්‍යවශ්‍ය විය (Parada et al., 2015). අධ්‍යයන කිහිපයකින් HO-1 සහ ගිනි අවුලුවන මැදිහත්කරු ස්‍රාවය අතර ප්‍රතිලෝම සහසම්බන්ධයක් ද පෙන්වා දී ඇත (Chora et al., 2007; Parada et al., 2015). එකඟතාවයකට අනුව, කර්කියුමින් පමණක් ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛල තුළ HO-1 ප්‍රකාශනය ඇති කරන බව අපි නිරීක්ෂණය කළෙමු.  

නිගමනය

මෙම අධ්‍යයනයෙන් පෙන්නුම් කළේ කර්කියුමින්ට LTA-උත්තේජනය කරන ලද ක්ෂුද්‍ර ග්ලියල් සෛලවල ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන ක්‍රියාකාරකම් ඇති බවත් එය NF-?B සහ p38 MAPK සක්‍රීය කිරීම නිෂේධනය කිරීම හරහා සහ Nrf2 සහ HO-1 ප්‍රකාශනය ඇති කළ හැකි බවත්ය (Figure ?6). තවද, curcumin එහි ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන මාත්‍රාවේදී BV-2 මයික්‍රොග්ලියල් සෛල තුළ සයිටොටොක්සික් බලපෑම් ඇති නොකරයි. Gram-positive බැක්ටීරියාව නිසා ඇතිවන සමහර ස්නායු ප්‍රදාහය ආශ්‍රිත ආබාධ සඳහා Curcumin හට චිකිත්සක හැකියාවක් තිබිය හැක.   �

Curcumin නොහොත් කහ යනු ප්‍රබල ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන ද්‍රව්‍යයක් වන අතර එය බොහෝ සෞඛ්‍ය ප්‍රතිලාභ ඇති බව පෙන්නුම් කර ඇත. පිළිකා නාශක, විෂාදනාශක සහ වයස්ගත වීම වැළැක්වීමේ ගුණ ඇති ප්‍රතිඔක්සිකාරකයක් ලෙස සැලකෙන curcumin වලට තුවාල සුව කිරීමට සහ මතකය වැඩි කිරීමට වඩා බොහෝ දේ කළ හැකිය. පර්යේෂණ අධ්‍යයනයන්ට අනුව, curcumin හෝ කහ ස්නායු ප්‍රදාහය හෝ මොළයේ දැවිල්ල අඩු කිරීමට උපකාරී වේ. මෙම ප්‍රබල ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන ප්‍රදාහ සයිටොකයින් නිෂ්පාදනය අවහිර කළ හැකි අතර සමස්ත යහපැවැත්ම ප්‍රවර්ධනය කරයි. - ආචාර්ය ඇලෙක්ස් ජිමිනෙස් ඩීසී, සීසීඑස්ටී ඉන්සයිට්

 

---

 

ස්නායු සම්ප්‍රේෂක තක්සේරු පෝරමය

[wp-embedder-pack width=”100%” height=”1050px” download=”all” download-text=”” attachment_id=”72741″ /] පහත දැක්වෙන ස්නායු සම්ප්‍රේෂක ඇගයීම් පෝරමය පුරවා ආචාර්ය ඇලෙක්ස් වෙත ඉදිරිපත් කළ හැක. ජිමිනෙස්. මෙම පෝරමයේ ලැයිස්තුගත කර ඇති රෝග ලක්ෂණ ඕනෑම ආකාරයක රෝගයක්, තත්වයක් හෝ වෙනත් ආකාරයක සෞඛ්‍ය ගැටලුවක් හඳුනා ගැනීමක් ලෙස භාවිතා කිරීමට අදහස් නොකෙරේ.  

---

  ආණ්ඩුකාර ඇබට්ගේ ප්‍රකාශයට ගෞරවයක් වශයෙන්, ඔක්තෝබර් යනු චිරොක්ට්‍රැක්ටික් සෞඛ්‍ය මාසයයි. ගැන තව දැනගන්න යෝජනාව.   ආහාර වේල් අතර ඔබට කොපමණ වාරයක් කැළඹීමක්, පහසුවෙන් කලබලයක් සහ නොසන්සුන් බවක් දැනෙන්නේද? ඔබ ඉදිරියට යාමට ඔබ කොපමණ වාරයක් කෝපි මත රඳා සිටිනවාද? කෑමට පෙර ඔබට කොපමණ වාරයක් අවධානය යොමු කිරීමට අපහසු වේද? දැවිල්ල මිනිස් සිරුරේ වැදගත් ප්‍රතිචාරයකි. තුවාල, ආසාදන, සහ/හෝ රෝගාබාධවලින් අපව ආරක්ෂා කිරීම සඳහා ප්රතිශක්තිකරණ පද්ධතිය මගින් එය සක්රිය කර ඇත. කෙසේ වෙතත්, මිනිස් සිරුරේ අධික ලෙස දැවිල්ල ඇති වුවහොත් කුමක් සිදුවේද? තවද, මොළයේ අධික දැවිල්ලක් ඇත්නම් කුමක් සිදුවේද? � මොළයේ දැවිල්ල වෙනත් පොදු රෝග ලක්ෂණ අතර කාංසාව, ආතතිය, මානසික අවපීඩනය, මොළයේ මීදුම, තෙහෙට්ටුව සහ උදාසීනත්වය වැනි විවිධ සෞඛ්‍ය ගැටලු ඇති කළ හැකිය. වාසනාවකට මෙන්, ස්නායු ආසාධනය විශාල ලෙස අඩු කිරීමට සහ මොළයේ ක්‍රියාකාරිත්වය වැඩි දියුණු කිරීමට උපකාරී වන එක් ස්වාභාවික පිළියමක් තිබේ. පර්යේෂණ අධ්‍යයනයන්ට අනුව, curcumin මොළයේ දැවිල්ලට එරෙහිව සටන් කළ හැකිය. ඉහත ලිපියේ අරමුණ වූයේ මයික්‍රොග්ලියා සහ මොළයේ යහපැවැත්ම සඳහා curcumin වල ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන බලපෑම් සාකච්ඡා කිරීමයි. ජෛව තාක්‍ෂණ තොරතුරු සඳහා ජාතික මධ්‍යස්ථානය (NCBI). අපගේ තොරතුරු වල විෂය පථය චිරොක්‍රැක්ටික්, මාංශ පේශි සහ ස්නායු සෞඛ්‍ය ගැටළු හෝ ක්‍රියාකාරී වෛද්‍ය ලිපි, මාතෘකා සහ සාකච්ඡා වලට සීමා වේ. මාංශ පේශි පද්ධතියේ තුවාල හෝ ආබාධවලට ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා අපි ක්‍රියාකාරී සෞඛ්‍ය ප්‍රොටෝකෝල භාවිතා කරමු. ඉහත විෂය කරුණු තවදුරටත් සාකච්ඡා කිරීමට, කරුණාකර ආචාර්ය ඇලෙක්ස් ජිමිනෙස්ගෙන් විමසීමට හෝ අප හා සම්බන්ධ වීමට නිදහස් වන්න 915-850-0900 .   ආචාර්ය ඇලෙක්ස් ජිම්ීනෙස් විසින් පාලනය කරන ලදී  

---

 

අතිරේක මාතෘකා සාකච්ඡාව: නිදන්ගත වේදනාව

හදිසි වේදනාව ස්නායු පද්ධතියේ ස්වාභාවික ප්‍රතිචාරයක් වන අතර එය සිදුවිය හැකි තුවාල පෙන්නුම් කිරීමට උපකාරී වේ. නිදසුනක් වශයෙන්, වේදනා සංඥා තුවාල වූ ප්රදේශයක සිට ස්නායු හා සුෂුම්නාව හරහා මොළයට ගමන් කරයි. තුවාලය සුව වන විට වේදනාව සාමාන්යයෙන් අඩු වේ, කෙසේ වෙතත්, නිදන්ගත වේදනාව සාමාන්ය වේදනාවට වඩා වෙනස් වේ. නිදන්ගත වේදනාවක් සමඟ, තුවාලය සුව වී ඇත්නම්, මිනිස් සිරුර මොළයට වේදනා සංඥා යැවීම දිගටම කරගෙන යනු ඇත. නිදන්ගත වේදනාව සති කිහිපයක් සිට අවුරුදු කිහිපයක් දක්වා පැවතිය හැකිය. නිදන්ගත වේදනාව රෝගියාගේ සංචලනයට විශාල ලෙස බලපෑ හැකි අතර එය නම්‍යශීලී බව, ශක්තිය සහ විඳදරාගැනීම අඩු කරයි.    

---

 

ස්නායු රෝග සඳහා Neural Zoomer Plus

වෛද්ය ඇලෙක්ස් ජිම්ීනෙස් ස්නායු රෝග ඇගයීමට උපකාර කිරීම සඳහා පරීක්ෂණ මාලාවක් භාවිතා කරයි. Neural Zoomer^TM Plus යනු නිශ්චිත ප්‍රතිදේහ-ප්‍රතිදේහජනක හඳුනාගැනීමක් ලබා දෙන ස්නායු විද්‍යාත්මක ස්වයං ප්‍රතිදේහ මාලාවකි. Vibrant Neural Zoomer^TM Plus සැලසුම් කර ඇත්තේ ස්නායු විද්‍යාත්මකව සම්බන්ධ විවිධ රෝග සඳහා සම්බන්ධතා ඇති ස්නායු විද්‍යාත්මක ප්‍රතිදේහජනක 48කට පුද්ගලයාගේ ප්‍රතික්‍රියාව තක්සේරු කිරීමටය. Vibrant Neural Zoomer^TM ප්ලස් අවදානම් කල්තියා හඳුනා ගැනීම සඳහා අත්‍යවශ්‍ය සම්පතක් සමඟින් රෝගීන් සහ වෛද්‍යවරුන් සවිබල ගැන්වීමෙන් සහ පුද්ගලාරෝපිත ප්‍රාථමික වැළැක්වීම කෙරෙහි වැඩි අවධානයක් යොමු කිරීමෙන් ස්නායු රෝග තත්ත්වයන් අවම කිරීම අරමුණු කරයි.  

මෙතිලේෂන් සහාය සඳහා සූත්ර

 

XYMOGEN ගේ තෝරාගත් බලපත්‍රලාභී සෞඛ්‍ය සේවා වෘත්තිකයන් හරහා සුවිශේෂී වෘත්තීය සූත්‍ර ලබා ගත හැකිය. XYMOGEN සූත්‍ර අන්තර්ජාලය විකිණීම සහ වට්ටම් කිරීම සපුරා තහනම්ය.

 

ආඩම්බරයෙන්,ආචාර්ය ඇලෙක්සැන්ඩර් ජිම්ීනෙස් XYMOGEN සූත්‍ර අපගේ රැකවරණය යටතේ සිටින රෝගීන්ට පමණක් ලබා ගත හැක.

 

අපට ඉක්මන් ප්‍රවේශය සඳහා වෛද්‍ය උපදේශනයක් පැවරීම සඳහා කරුණාකර අපගේ කාර්යාලය අමතන්න.

 

ඔබ රෝගියෙක් නම් තුවාල වෛද්‍ය සහ චිරොක්ට්‍රැක්ටික් සායනය, ඔබට ඇමතීමෙන් XYMOGEN ගැන විමසිය හැක 915-850-0900.   ඔබගේ පහසුව සහ සමාලෝචනය සඳහා XYMOGEN නිෂ්පාදන කරුණාකර පහත සබැඳිය සමාලෝචනය කරන්න. *XYMOGEN-නාමාවලිය-බාගත   * ඉහත සියලුම XYMOGEN ප්‍රතිපත්ති තදින්ම ක්‍රියාත්මක වේ.  

---